使用及效果：
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系：
10×擴(kuò)增緩沖液 　 10ul
4種dNTP混合物 　 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 　　　 　 0.1～2ug
 　 Taq DNA聚合酶 　 2.5u
Mg2+　　　　　　 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱： 停乳鏈球菌(StD)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格： 50T
貨號：BH-P64351
公司產(chǎn)品僅用于科研分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
旋毛殼Bipped B樣蛋白抗體Human UBA3(NEDD8-activating enzyme E1 catalytic subunit) ELISA Kit異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒

莖點(diǎn)霉屬艾杜糖-2-硫酸酯酶抗體Human PSPC1(Paraspeckle component 1) ELISA Kit異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA試劑盒

鮑姆木層孔菌α-L-艾杜糖苷酶抗體Human PSMG3 ELISA Kit異鎖鏈素(IDES)ELISA試劑盒

胞外多聚物鞘氨單胞菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白122抗體Human PSPH ELISA Kit異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒

地衣芽孢桿菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白140抗體Human PSMD6 ELISA Kit異常凝血酶原(APT)ELISA試劑盒

福氏志賀氏菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白20抗體Human PSMD7 ELISA Kit異腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒

稻綠核菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體Human PSME2 ELISA Kit乙酰乙酸(ACAC)ELISA試劑盒

葡萄座腔菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白80抗體Human PSME1 ELISA Kit乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒

突孢毛殼CD101抗體Human PSMC4(Proteasome 26S subunit ATPase 4)  ELISA Kit乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒

產(chǎn)黃青霉球蛋白超家族成員5抗體Human PSMC6(Proteasome 26S subunit ATPase 6)  ELISA Kit乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒

大腸埃希菌alpha干擾素誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白2抗體Human PSMD10 ELISA Kit乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒

季也蒙假絲酵母胰島素抗體Human PSMD12 ELISA Kit乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒

巴西果小克銀漢霉Human PSMD11 ELISA Kit乙脫氫酶18家族成員A1(ALDH18A1)ELISA試劑盒

Pseudomonas tremae中間絲家族孤啡肽2蛋白抗體Human PSMD14(26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 14)  ELISA Kit乙脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒

吉氏根瘤菌CD339抗體Human PSMB2 ELISA Kit乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)ELISA試劑盒

洋蔥伯克霍爾德氏菌連接粘附分子1抗體Human PSMD13 ELISA Kit乙脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒
停乳鏈球菌(StD)檢測試劑盒(熒光-PCR法)銜接蛋白β抗體凝血因子Ⅷ(FⅧ)檢測試劑盒FⅧ ELISA Kit

銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體凝血因子Ⅶ(FⅦ)檢測試劑盒FⅦ ELISA Kit

水通道蛋白-9抗體凝血因子Ⅵ(FⅥ)檢測試劑盒FⅥ ELISA Kit

膜粘連蛋白A3抗體凝血因子Ⅴ(FⅤ)檢測試劑盒FⅤ ELISA Kit

膜粘連蛋白 A4抗體凝血因子Ⅳ(FⅣ)檢測試劑盒FⅣ ELISA Kit

自噬相關(guān)蛋白8A抗體凝血因子Ⅲ(FⅢ)檢測試劑盒FⅢ ELISA Kit

磷化蛋白激酶B抗體凝血因子Ⅱ(FⅡ)檢測試劑盒FⅡ ELISA Kit

磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗體凝血因子Ⅰ(FⅠ)檢測試劑盒FⅠ ELISA Kit

磷化蛋白激酶B抗體凝血酶原片段F1+2(F1+2)檢測試劑盒F1+2 ELISA Kit
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。