產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 傳染性對(duì)蝦皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號(hào):BH-P64347
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;拓i胰島素單克隆抗體Human SAA4(Serum amyloid A-4 protein) ELISA Kit載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA試劑盒
釀酒酵母KB抑制蛋白激酶α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體Human RAB11FIP3 ELISA Kit載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
美澳型核果褐腐病菌抗重組人胰島素抗體Human ENPP1(Ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase family member 1) ELISA Kit載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒
產(chǎn)皮歐(票)霉素鏈霉菌磷酸化肌聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體Human RAB11FIP5 ELISA Kit載脂蛋白A4(Apo-A4)ELISA試劑盒
奧氏蜜環(huán)菌胰島素受體抗體Human PVRL4 ELISA Kit載脂蛋白A2(apo-A2)ELISA試劑盒
釀酒酵母胰島素受體α抗體Human PXMP2 ELISA Kit載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
石泉海源菌胰島素受體β抗體Human PWP1 ELISA Kit載脂蛋白A1(apo A1)ELISA試劑盒
猴假單胞菌KB抑制蛋白激酶α/β抗體Human PWP2 ELISA Kit運(yùn)甲狀腺素蛋白/前白蛋白(TTR)ELISA試劑盒
鹽漬喜鹽芽孢桿菌白介素12抗體Human RABGAP1L ELISA Kit孕烯酮(PREG)ELISA試劑盒
聚團(tuán)屈撓桿菌干擾素誘導(dǎo)35蛋白抗體Human PCK2(Phosphoenolpyruvate carboxykinase [GTP], mitochondrial) ELISA Kit孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒
菊池鏈格孢完整膜蛋白E25A抗體Human CYP27B1(25-hydroxyvitamin D-1 alpha hydroxylase, mitochondrial) ELISA Kit孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒
弗雷德里克斯堡假單胞菌小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Human RABGEF1 ELISA Kit孕酮(PROG)ELISA試劑盒
日本擬無(wú)枝酸菌胰島素降解酶抗體Human PYGO2 ELISA Kit孕誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)ELISA試劑盒
禽腺病Ⅴ型KB抑制蛋白激酶β抗體Human PWP2 ELISA Kit孕/孕酮(PROG)ELISA試劑盒
淺黃曲霉白介素17受體D抗體Human PYCR1 (Pyrroline-5-carboxylate reductase 1, mitochondrial)ELISA Kit遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白1(FUBP1)ELISA試劑盒
根瘤菌白介素-17B抗體Human PXMP2 ELISA Kit原纖維蛋白-1(FBN1)ELISA試劑盒
傳染性對(duì)蝦皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)纖維生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2抗體補(bǔ)骨脂素(標(biāo)準(zhǔn)品) Copper powder
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin3抗體布渣葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Copper(II) carbonate basic
結(jié)構(gòu)特異性核酶FEN1抗體菜油甾 Copper(II) oxide
FAM61B蛋白抗體參麥提取物(標(biāo)準(zhǔn)品) Copper(II) pyrophosphate
FAM63A蛋白抗體蠶沙(標(biāo)準(zhǔn)品) Copper(II) tartrate, trihydrate
上皮分泌型FAM3C蛋白抗體蒼耳亭(標(biāo)準(zhǔn)品) dADP
FAM36A蛋白抗體蒼耳子(標(biāo)準(zhǔn)品) dCDP, 2'-Deoxycytidine-5'-Diphosphate,3sodium salt
FAM50A蛋白抗體蒼術(shù)(茅蒼術(shù))(標(biāo)準(zhǔn)品) DMP
FAM134C蛋白抗體蒼術(shù)苷A Dodecyl gallate