使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 麻疹病毒(MV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64341
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對??則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
產(chǎn)氣腸桿菌(現(xiàn)1)抑制素A/Inhibin α抗體Human RBM24(RNA Binding Motif Protein 24) ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒
布魯氏菌雞傳染性喉氣管炎病糖蛋白E抗體Human RBMS2 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2(TRAIL-R2/DR5)ELISA試劑盒
不規(guī)則鹽海菌小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體Human RBM25 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒
金針菇(毛柄菌、冬菇)白介素-7受體a抗體Human RBM26 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒
畫眉草彎孢整合素α3抗體Human RBP2 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒
殼菌整合素β5抗體Human ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒
枯草芽胞桿菌整合素α1抗體Human RBMX2 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)ELISA試劑盒
紫紅曲霉白介素2受體β鏈抗體 IL-2RβHuman RBM39 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1(TRAF1)ELISA試劑盒
pBlueScript SK(+)干擾素α2b抗體Human RBM28 ELISA Kit腫瘤壞死因子受體超家族成員18(TNFRSF18)ELISA試劑盒
馬賽菌屬誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體Human RBM4 ELISA Kit腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒
狹霉素鏈霉菌雞傳染性法氏囊病病抗體Human RBM42 ELISA Kit腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒
冷溫木拉克酵母白介素-17抗體Human RBM46 ELISA Kit腫瘤壞死因子超家族15(TL1A/TNFSF15)ELISA試劑盒
松口蘑5'肌苷磷酸脫氫酶2抗體Human RBM41 ELISA Kit腫瘤壞死因子γ(TNFγ)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌即刻早期應(yīng)答基因5樣蛋白抗體Human RASGRP3(Ras guanyl-releasing protein 3) ELISA Kit腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒
腸球菌屬整合素αV抗體Human RBM14 ELISA Kit腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒
泡盛曲霉白介素-19抗體Human RBM15 ELISA Kit腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒
麻疹病毒(MV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)纖維母表面蛋白抗體五加苷E(標(biāo)準(zhǔn)品) Aluminum oxide, active
前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體五加皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Aluminum oxide, active
FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端)楤木(標(biāo)準(zhǔn)品) Aluminum potassium sulfate docecahydrate
成纖維生長因子受體2抗體楤木皂苷A Amikacin
成纖維生長因子受體4抗體粗葉懸鉤子甙 Aminophyllin hydrate
凝血酶原酶(纖維介素)抗體醋辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium bismuth citrate, hydrate
衰老關(guān)鍵蛋白抗體**斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)... Ammonium bromide
凋亡調(diào)節(jié)因之一抗體大車前苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium iodide
凋亡調(diào)節(jié)因之一抗體(短型)大豆苷,黃豆苷 (標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。