使用及效果:
標準的PCR反應(yīng)體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 赤羽病病毒(AKAV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64338
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
頭狀絲孢酵母Iroquois同源蛋白5抗體Human RFK ELISA Kit總蛋白C(TPC)ELISA試劑盒
膠孢鐮孢整合素αE抗體Integrin αEHuman REEP5 ELISA Kit總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒
淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種間粘附分子-2抗體Human REEP2 ELISA Kit自然殺傷(NK)ELISA試劑盒
醬油曲霉整合素β3抗體Human REEP6 ELISA Kit自然抗性相關(guān)巨噬蛋白2(NRAMP-2)ELISA試劑盒
雜色曲霉整合素α4抗體Human RELT ELISA Kit自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)ELISA試劑盒
豬丹絲菌白介素15抗體Human RGS4 ELISA Kit樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒
假單胞菌屬磷酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體Human REM2 ELISA Kit轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒
平菇新農(nóng)1號一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型)Human RFTN1 ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
沙針草狀孢菌干擾素α6抗體Human RFX3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄中介因子1-β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)ELISA試劑盒
灰紅鏈霉菌整合素β2/Integrin β2抗體Human RFWD3 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒
茄拉爾氏菌抑制素A/Inhibin βA抗體Human RFTN2 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子SOX-5(SOX5)ELISA試劑盒
膠質(zhì)芽孢桿菌*胰島素受體底物-3抗體Human RFX5 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子SOX-4(SOX4)ELISA試劑盒
釀酒酵母胰島素受體底物p53蛋白抗體Human RFXAP ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子1(AP-1)ELISA試劑盒
紅法夫酵母*胰島素受體底物-1抗體Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) ELISA Kit轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒
布萊克威爾假絲酵母胰島素受體底物-2抗體Human RGR ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長因子-β誘導(dǎo)蛋白IG-H3(TGFBI/BIGH3)ELISA試劑盒
豬丹絲菌胰島素受體底物-4抗體Human RGMA ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長因子β受體3(TGFBR3)ELISA試劑盒
赤羽病病毒(AKAV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)纖溶酶原激活物抑制劑1 RNA結(jié)合蛋白抗體二乙二二乙 Diethylene Glycol Diethyl Ether >98.0%(GC)Human, Mouse, Rat
剪接因子,精氨/絲氨豐富19雙(2,4-二)二硫 Bis(2,4-dinitrophenyl) Disulfide >80.0%(LC)Human
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體二硫化四秋蘭姆 Tetramethylthiuram Disulfide >97.0%(T)Human, Mouse, Rat
S腺苷L-同型半胱氨水解酶抗體N,N-二(2-羥乙)甘氨[生物研究用Good's緩沖液中的成分] N,N-Di(2-hydroxyethyl)glycine [Good's buffer component for biological research]>99.0%(T)Human, Mouse, Rat
磷化Smad2抗體N,N-二(2-羥乙)甘氨[生物研究用Good's緩沖液中的成分] N,N-Di(2-hydroxyethyl)glycine [Good's buffer component for biological research]>99.0%(T)Human, Mouse, Rat
磺酰脲類**受體1抗體N,N-二(2-羥乙)甘氨[生物研究用Good's緩沖液中的成分] N,N-Di(2-hydroxyethyl)glycine [Good's buffer component for biological research]>99.0%(T)Human, Rat
突觸泡蛋白2A抗體雙[4-(二氨)苯] Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane >98.0%(GC&T)Human, Mouse, Rat
突觸融合蛋白1抗體雙[4-(二氨)苯] Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane >98.0%(GC&T)Human
磷化核突觸蛋白α抗體賓雪德拉氏綠隱色 Bindschedler's Green Leuco Base >98.0%(LC&T)Human, Mouse, Rat
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。