使用及效果:
標準的PCR反應(yīng)體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 牛結(jié)節(jié)性皮膚?。?/span>LSDV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64316
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
血紅擬革蓋菌肝生長因子激活物抑制劑抗體Human SERPINI2 ELISA Kit倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒
高溫金針菇HA tag標簽單克隆抗體Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit倉鼠低密度脂蛋白(VLDL)試劑盒
紡織品 纖維含量(棉與莫代爾纖維)血紅素抗體Human SETD1B ELISA Kit倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) 試劑盒
黃曲霉戊型肝炎病抗體Human SERPINB8 ELISA Kit倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒
釀酒酵母神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human SERPINB9 ELISA Kit倉鼠核因子κB(NF-κB)試劑盒
枯草芽孢桿菌神經(jīng)膠質(zhì)生長因子/神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白β抗體Human SERPIND1(Serpin family D member 1) ELISA Kit倉鼠谷胱甘肽過氧化物酶3(GPX3)試劑盒
枯草芽孢桿菌組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit倉鼠促卵泡素(FSH)試劑盒
發(fā)酵乳桿菌(現(xiàn)貨)組蛋白去乙?;?/span>3抗體Human SERPINI2 ELISA Kit倉鼠二(MDA)試劑盒
單核增生利斯特菌高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體Human SERINC1 ELISA Kit倉鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒
宇佐美曲霉腺病六鄰體蛋白抗體Human SERINC2 ELISA Kit倉鼠白介素6(IL-6)試劑盒
龜裂鏈霉菌高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體Human SERF2 ELISA Kit倉鼠白介素3(IL-3)試劑盒
多源中間根瘤菌轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α抗體Human SENP1 ELISA Kit倉鼠白介素2(IL-2)試劑盒
釀酒酵母熱休克蛋白β7抗體Human GAL(Galanin peptides) ELISA Kit倉鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒
微球菌E3連接酶抑制素受體2抗體Human SENP3 ELISA Kit倉鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒
芽孢桿菌透明質(zhì)酸及粘蛋白3抗體Human SENP5 ELISA Kit倉鼠γ干擾素(IFNG)試劑盒
臭曲霉22號染色體開放閱讀框28抗體Human CFP(Properdin) ELISA Kit倉鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)試劑盒
牛結(jié)節(jié)性皮膚?。?/span>LSDV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白石菖蒲(標準品) Ginsenoside Rd
單酰甘油脂肪酶抗體石吊蘭(標準品) Gliquidone
致癌因n-Myc抗體石吊蘭素 Gliquidone
多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體石斛酚(標準品) Ginsenoside Rf
線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體石斛(標準品) Ginsenoside Rg1
蛋白激酶MST2抗體石見穿(標準品) 20(R)Ginsenoside Rg2
DNA結(jié)合蛋白C抗體石椒草(標準品) Ginsenoside Rg2
胃粘液素抗體石榴皮(標準品) 20(R)Ginsenoside Rg3
促黑**γ抗體石榴皮鞣素;安石榴林(標準品) Ginsenoside Rg3
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。