使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 犬衣原體(CP)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號(hào):BH-P64314
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)???則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
浸麻類芽孢桿菌絲氨酸羧甲半胱氨酸合成酶抗體Human SF3A3 ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)試劑盒
解淀粉芽孢桿菌癌高表達(dá)蛋白Hec1抗體Human SF3A2 ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)試劑盒
腐皮鐮孢磷酸化***敏感脂肪酶抗體Human SF3B14 ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)試劑盒
微枝形桿菌組蛋白去乙?;?/span>1抗體Human HYAL3(Hyaluronidase-3) ELISA Kit大鼠17-酮類固(17-KS)試劑盒
釀酒酵母半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體Human SF3B4 ELISA Kit大鼠17-羥孕烯酮試劑盒
小果豆包菌磷酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅)Human SF3B2 ELISA Kit大鼠17羥孕酮(17-OHP)試劑盒
惡臭假單胞菌異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體(果蠅)Human SF3B3 ELISA Kit大鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)試劑盒
噬果膠黃桿菌缺氧誘導(dǎo)因子2α /HIF-2α抗體Human SF3B5 ELISA Kit大鼠17-α甲睪酮(17-αMT)試劑盒
釀酒酵母甲型流感病M2抗體Human SFT2D3 ELISA Kit大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)試劑盒
頂青霉熱休克蛋白-47抗體Human SFXN1 ELISA Kit大鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)試劑盒
梨紅菇人類狀瘤病16抗體Human SFXN2 ELISA Kit大鼠11β羥類固脫氫酶1型(11β-HSD1)試劑盒
環(huán)狀芽孢桿菌缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體HIF-1αHuman SFXN3 ELISA Kit大鼠1,4,5-三磷酸肌(IP3)試劑盒
瑟氏泰勒蟲(寧縣株)組蛋白H3抗體Human BCO2(Beta,beta-carotene 9′,10′-oxygenase) ELISA Kit大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)試劑盒
魯氏接合酵母人類皰疹病8抗體/皰疹病8型Human SGCE ELISA Kit大鼠1,25-二羥維生素D(3)24-羥化酶,線粒體(CYP24A1)試劑盒
食環(huán)氧化物交替紅色桿菌人類巨病抗體Human SGF29 ELISA Kit大鼠1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)試劑盒
孟氏假單胞菌人類皰疹病8抗體Human SGCG ELISA Kit大鼠 SCUBE1 試劑盒
犬衣原體(CP)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)微管相關(guān)蛋白樣蛋白3抗體熒光素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Sephadex G-50
內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體右雷佐生;右亞(標(biāo)準(zhǔn)品) Sephadex G-50
雌**受體β抗體右旋蘭索拉唑(標(biāo)準(zhǔn)品) (S)-(+)-Mandelic acid
雌**受體α抗體右佐匹克隆(標(biāo)準(zhǔn)品) (R)-(?)-Mandelic acid
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體魚腥草素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Aminohydantoin Hydrochloride
Ephrin A2抗體愈創(chuàng)甘油(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Aminohydantoin Hydrochloride
大腸埃希菌菌體蛋白抗體愈創(chuàng)木酚磺(標(biāo)準(zhǔn)品) ACTH (1-24), human
雌**硫轉(zhuǎn)移酶抗體遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品) Bradykinin
E Tag標(biāo)簽抗體月桂(標(biāo)準(zhǔn)品) Bradykinin acetate
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。