產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 牛支原體(MYPB)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號(hào):BH-P64306
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
釀酒酵母人類白抗原G抗體(N端)Human SLCO4C1 ELISA Kit大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)試劑盒
Luteolibacter人類白抗原G抗體(C端)Human SLFNL1 ELISA Kit大鼠Tau蛋白試劑盒
埃希氏菌屬缺氧誘導(dǎo)基因95抗體Human SLC43A1 ELISA Kit大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)試劑盒
白乳菇泛素蛋白連接酶E2抗體Human SLCO6A1 ELISA Kit大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)試劑盒
高地芽胞桿菌同源盒蛋白HOXC9抗體Human SLC27A3 ELISA Kit大鼠Smad7 試劑盒
晦澀小粘束霉環(huán)化核苷酸調(diào)控陽(yáng)離子通道蛋白亞型2/4抗體Human SLC30A6 ELISA Kit大鼠Smad1 試劑盒
果生鏈核盤菌轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) ELISA Kit大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)試劑盒
云南球蓋菇轉(zhuǎn)錄因子HES6抗體Human SLC35F2 ELISA Kit大鼠S100B蛋白(S-100B)試劑盒
騷動(dòng)厄氏菌同源盒蛋白H6亞型2抗體Human SLC35A1 ELISA Kit大鼠S100-A5蛋白(S100A5)試劑盒
Sphingomonas phyllosphaerae硫酸乙酰肝素6腦苷脂轉(zhuǎn)硫酸酶1抗體Human SLC34A2 ELISA Kit大鼠Rho相關(guān)GTP結(jié)合蛋白R(shí)hoE 試劑盒
球孢白僵菌神經(jīng)保護(hù)肽HN抗體Human SLC36A4 ELISA Kit大鼠Rho鳥苷酸交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)試劑盒
美澳型核果褐腐病菌大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體(N端)Human SLC30A6 ELISA Kit大鼠Ras相關(guān)蛋白R(shí)ab-11A 試劑盒
麗齒菌屬透明質(zhì)酸合成酶1抗體Human SLC25A18 ELISA Kit大鼠Ras相關(guān)C3肉素底物1(RAC1)試劑盒
美澳型核果褐腐病菌缺氧誘導(dǎo)因子3α/HIF-3α抗體Human SLC34A2 ELISA Kit大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)試劑盒
黑曲霉缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化酶抗體Human SLC25A15 ELISA Kit大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)試劑盒
溶血性曼氏桿菌透明質(zhì)酸酶2/玻璃酸酶2抗體Human SLC25A22 ELISA Kit大鼠P物質(zhì)(SP)試劑盒
牛支原體(MYPB)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)外周蛋白2抗體2,4-二氨-6-苯-7-蝶啶 4-Nitropyrene
區(qū)帶蛋白PZP抗體2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三氟)苯... 2-Aminofluorene
蛋白香葉烯轉(zhuǎn)移酶1β(FTβ)抗體2-[(2,6-二)氨]苯 2-Amino-9-fluorenone
原鈣粘蛋白15抗體2-(巰)腺苷 5'-三磷四鈉鹽水合物 2-Amino-9,9-dimethylfluorene
原鈣粘蛋白β2抗體2-氨-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋(阿那格... 9-Bromofluorene
原鈣粘蛋白β4抗體2-氨-6,8-二羥嘌呤鹽鹽 2-Bromofluorene
原鈣粘蛋白γ10抗體2-氨-6-羥-8-巰嘌呤 2-Bromo-9-fluorenone
原鈣粘蛋白γA4抗體2-氨-6-巰嘌呤-9-D-核苷水合物 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene
原鈣粘蛋白γA2抗體2-氨腺苷 2,7-Diaminofluorene