產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 伊氏錐蟲(TE)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號(hào):BH-P64301
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈???延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
釀酒酵母同源異型盒基因HLX1蛋白抗體Human SNX15 ELISA Kit大鼠白介素32(IL-32)試劑盒
霍氏瓶霉三羥基基輔酶A合成酶1Human SNX18 ELISA Kit大鼠白介素3(IL-3)試劑盒
釀酒酵母熱休克因子1抗體Human SNX19 ELISA Kit大鼠白介素2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)試劑盒
漢遜德巴利酵母磷酸化熱休克因子1抗體Human SNX20 ELISA Kit大鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)試劑盒
疣孢青霉熱休克蛋白71抗體Human SNRPB ELISA Kit大鼠白介素28B(IL-28B)試劑盒
無(wú)花果擬盤多毛孢微絲相關(guān)蛋白hHBrk1抗體Human SMO ELISA Kit大鼠白介素28A(IL-28A)試劑盒
竹瘤座菌植烷酰輔酶A羥化酶2抗體Human SNX22 ELISA Kit大鼠白介素27(IL-27)試劑盒
食用香料 折光指數(shù)、相對(duì)密度 A型流感病H9N1神經(jīng)氨酸酶型抗體Human SNAPC5 ELISA Kit大鼠白介素26(IL-26)試劑盒
鹽敏芽孢桿菌A型流感病H9N1血凝素型抗體Human SMPDL3B(Sphingomyelin Phosphodiesterase Acid Like 3B) ELISA Kit大鼠白介素23(IL-23)試劑盒
多帶革孔菌人類狀瘤病33抗體Human SMPX ELISA Kit大鼠白介素22(IL-22)試劑盒
少根根霉A型病H1N1蛋白抗體Human SNAPIN ELISA Kit大鼠白介素21(IL-21)試劑盒
多主葡萄殼菌甲型肝炎病聚蛋白VP1抗體Human SNCAIP ELISA Kit大鼠白介素20(IL-20)試劑盒
長(zhǎng)雙歧桿菌長(zhǎng)亞種造血干特異性蛋白抗體Human CALB1(Calbindin) ELISA Kit大鼠白介素2(IL-2)試劑盒
滑菇轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human SMNDC1 ELISA Kit大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)試劑盒
枯草芽孢桿菌同源盒蛋白C6抗體Human SNAP29 ELISA Kit大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒
植物乳桿菌植物亞種同源盒蛋白C4抗體Human SMO ELISA Kit大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)試劑盒
伊氏錐蟲(TE)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)脫氧核糖核酶γ抗體山梨(標(biāo)準(zhǔn)品) Cinoxacin
死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體麝香草酚(標(biāo)準(zhǔn)品) Norandrostenedione
脫氧核糖核酶1抗體上腺色腙(卡巴克洛)標(biāo)準(zhǔn)品 Dapagliflozin propanediol hydrate
脫氧核糖核酶2抗體生物素(標(biāo)準(zhǔn)品) Anacetrapib;MK0859
死亡防衛(wèi)蛋白1抗體十八烷,1-十八(標(biāo)準(zhǔn)品) Dabigatran etexilate
Duffy血型趨化因子受體抗體十二烷硫鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Rivaroxaban
DEK癌因結(jié)合蛋白石膽(標(biāo)準(zhǔn)品) Rivaroxaban
PSD95結(jié)合蛋白1抗體舒巴坦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Apixaban
PSD95結(jié)合蛋白2抗體舒巴坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Perifosine