PCR反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng)： 綿羊痘病毒(SPPV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格： 50T
貨號(hào)：BH-P64292
公司產(chǎn)品僅用于科研分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

使用及效果：
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系：
10×擴(kuò)增緩沖液 　 10ul
4種dNTP混合物 　 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 　　　 　 0.1～2ug
 　 Taq DNA聚合酶 　 2.5u
Mg2+　　　　　　 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
Enterobacter cowanii Inoue et al. 磷酸化HOMER3蛋白抗體Human ST6GALNAC1 ELISA Kit大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)試劑盒

克魯弗酵母轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體（原癌基因H-ras抗體）Human ST7 ELISA Kit大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)試劑盒

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短密青霉HOMER3蛋白抗體Human ST7L ELISA Kit大鼠肥胖抑制素試劑盒

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*喜溫酸硫桿菌磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Human SRR ELISA Kit大鼠泛素激活酶(E1/UBAE)試劑盒

菌核鏈霉菌附睪分泌蛋白4抗體Human SRPX2 ELISA Kit大鼠泛素蛋白(Ub)試劑盒

腐爛粘束梗霉基化組蛋白H3抗體Human SRRM1 ELISA Kit大鼠法尼X受體(FXR)試劑盒

棒曲霉三羥基基輔酶A還原酶抗體Human C1QTNF3(Complement C1q tumor necrosis factor-related protein 3) ELISA Kit大鼠二酰基甘油(DAG/DG)試劑盒
綿羊痘病毒(SPPV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)褪黑素受體1B抗體麥冬（標(biāo)準(zhǔn)品） (R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate

多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體麥冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖（1→2）-β-... 2,6-Dichloropurine

多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體麥冬內(nèi)酯A 2,4-Dichloroquinazoline

線(xiàn)粒體內(nèi)膜蛋白抗體麥冬皂苷D 9-(Chloromethyl)anthracene

質(zhì)金屬蛋白酶-8/膠原酶2抗體麥冬皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) Ethyl ferulate

質(zhì)金屬蛋白酶11抗體麥冬皂苷D（標(biāo)準(zhǔn)品） CAPS

質(zhì)金屬蛋白酶-12抗體麥角甾；麥角固(標(biāo)準(zhǔn)品) Crotonoside

質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體麥芽（標(biāo)準(zhǔn)品） Brazilin

質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體滿(mǎn)山白（標(biāo)準(zhǔn)品） Sarsasapogenin