使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 禽傳染性****病毒(AIBV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號(hào):BH-P64222
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
米曲霉F-box蛋白9抗體Human ZPBP ELISA Kit馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)試劑盒
昆明靈芝脂肪?;o酶A還原酶1抗體Human ZO-2 ELISA Kit馬球蛋白G(IgG)試劑盒
輪紋大莖點(diǎn)菌生長(zhǎng)抑制基因39蛋白抗體Human ZNF740 ELISA Kit馬球蛋白E(IgE)試劑盒
云芝栓孔菌(變色栓菌)磷酸神經(jīng)膜抗體Human ZNF74 ELISA Kit馬錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD/SOD2)試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型脆性X相關(guān)蛋白1抗體Human ZRANB2 ELISA Kit馬試劑盒
鐮孢菌F-box蛋白家族FBXO31抗體Human ZNF746 ELISA Kit馬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒
Aureimonas ureilytica卵巢濾泡抗體(BHD綜合征)Human ZRANB3 ELISA Kit馬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)試劑盒
霉擬蠟孔菌羊抗人纖維蛋白原抗體Human ZNF750 ELISA Kit馬黃體**素(LH)試劑盒
薄黑孔菌FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子7抗體Human ZNF785 ELISA Kit馬環(huán)磷酸腺苷(cAMP)試劑盒
干草鞘氨單胞菌脂肪酸結(jié)合蛋白5抗體(上皮型)Human ZNF774 ELISA Kit馬環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)試劑盒
抗霉菌鏈霉菌脂氧素受體1抗體Human ZNF846 ELISA Kit馬過(guò)氧化氫酶(CAT)試劑盒
秀珍菇半胱氨酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體Human ZNF763 ELISA Kit馬谷胱甘肽還原酶(GSR)試劑盒
尿酸氧化節(jié)桿菌叉頭蛋白F1抗體Human ZNF839 ELISA Kit馬睪酮(T)試劑盒
枯草芽胞桿菌高嗜酸性粒綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體Human ZNHIT1 ELISA Kit馬促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)試劑盒
大腸埃希菌叉頭蛋白D4Human ZNHIT2 ELISA Kit馬促卵泡素(FSH)試劑盒
傳染性****病磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體Human ZNF703 ELISA Kit馬雌(E)試劑盒
禽傳染性****病毒(AIBV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
***敏感脂肪酶抗體SLC6A19 /FITC 熒光素標(biāo)記依賴鈉鈣交換蛋白6IgG
血紅蛋白α1/α-Globin抗體SLC16A3/MCT-4/FITC 熒光素標(biāo)記MCT4抗體IgG
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。