使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 禽腺病毒(FADV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64217
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
釀酒酵母單跨膜蛋白FOXRED1抗體Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT綿羊彈性蛋白酶2,中性粒(ELA2)試劑盒
淺紫灰鏈霉菌淺紫灰亞種FOXRED2蛋白抗體Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KIT綿羊催產(chǎn)素(OT)試劑盒
釀酒酵母巖藻糖1磷酸鳥苷酰轉移酶抗體Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊雌二(E2)試劑盒
雷斯青霉外基質(zhì)蛋白FREM1抗體Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT綿羊成纖維生長因子23(FGF23)試劑盒
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)原癌基因FRAT1抗體Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊補體片段3b受體(C3bR)試劑盒
黑曲霉叉頭蛋白D1抗體Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT綿羊補體片段3a(C3a)試劑盒
長柔毛栓孔菌凝血因子11重鏈抗體Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT綿羊白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒
謝瓦曲霉凝血因子12輕鏈抗體Human APCDD1 (Protein APCDD1) ELISA KIT綿羊白介素6(IL-6)試劑盒
表皮葡萄球菌FLAG Tag標簽抗體(C端)Human ADRB1 (Beta-1 adrenergic receptor) ELISA KIT綿羊白介素4(IL-4)試劑盒
苛求芽胞桿菌補體因子I重鏈抗體Human SPAG9(C-Jun-amino-terminal kinase-interacting protein 4) ELISA Kit綿羊白介素2受體(IL-2R)試劑盒
煙管菌凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關抗原輕鏈抗體Human ADAR (Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) ELISA KIT綿羊白介素2(IL-2)試劑盒
節(jié)桿菌磷酸化叉頭蛋白4抗體Human STC2(Stanniocalcin-2) ELISA Kit綿羊白介素1β(IL-1β)試劑盒
青霉磷酸化叉頭蛋白4抗體Human ADCY9 (Adenylate cyclase type 9) ELISA KIT綿羊白介素1α(IL-1α)試劑盒
普利茅斯沙雷氏菌甲酸基肽受體1抗體Human AHCYL1 (Adenosylhomocysteinase 2) ELISA KIT綿羊白介素13(IL-13)試劑盒
甲型副傷寒沙門氏菌磷酸化粘著斑激酶抗體Human ADSL(Adenylosuccinate lyase) ELISA Kit綿羊白介素12(IL-12)試劑盒
窄食單胞菌FUT5抗體Human AHCYL2 (Adenosylhomocysteinase 3) ELISA KIT綿羊白介素10(IL-10)試劑盒
禽腺病毒(FADV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
熱休克蛋白-60抗體Phospho-SHIP2 (Tyr986/987) /FITC 熒光素標記磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體IgG
熱休克蛋白-70抗體Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC 熒光素標記磷酸化受體結合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體IgG
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。