使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 水貂源性成分檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
規(guī)格: 48T 0.2PCR管
貨號:BH-P64198
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
弗雷德里克斯堡假單胞菌上皮有絲分裂蛋白抗體Human EPS8L1 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 1) ELISA KIT犬S100B蛋白(S100B)試劑盒
不吸水鏈霉菌Emerin蛋白抗體Human ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) ELISA KIT犬P選擇素(SELP)試劑盒
寄生孢外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體Human ERN2 (Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE2) ELISA KIT犬P物質(zhì)受體(TACR1)試劑盒
巨大曲霉磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員5抗體Human EPS8L3 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 3) ELISA KIT犬N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒
禾粘座孢霉(或禾漆斑菌)早期生長反應(yīng)蛋白2抗體Human EPC1 (Enhancer of polycomb homolog 1) ELISA KIT犬N端前心鈉肽(NT-ProANP)試劑盒
鹽水鹽土生古菌磷酸化雌受體β抗體Human ERAS (GTPase ERas) ELISA KIT犬N端前腦鈉素(NT-proBNP)試劑盒
豬丹絲菌乙激酶β抗體Human ECHDC1 (Ethylmalonyl-CoA decarboxylase) ELISA KIT犬KI-67抗原(MKI67)試劑盒
栗疫菌微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體Human ERRFI1(ERBB receptor feedback inhibitor 1) ELISA Kit犬I 型膠原蛋白試劑盒
波恩佩島蒼黃色桿菌減數(shù)分裂內(nèi)切酶EME1抗體Human EVPL (Envoplakin) ELISA KIT犬E選擇素(SELE)試劑盒
木霉延伸突觸蛋白2抗體Human ENOSF1 (Mitochondrial enolase superfamily member 1) ELISA KIT犬C肽(C-Peptide)試劑盒
膠孢延伸突觸蛋白1抗體Human ERAS (GTPase ERas) ELISA KIT犬C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒
紅根須腹菌紅膜蛋白4.2抗體Human TYROBP(TYRO protein tyrosine kinase-binding protein) ELISA Kit犬CD8分子(CD8)試劑盒
南類芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體Human ENOSF1 (Mitochondrial enolase superfamily member 1) ELISA KIT犬CD6分子(CD6)試劑盒
芽孢桿菌內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體Human ERRFI1(ERBB receptor feedback inhibitor 1) ELISA Kit犬CD4分子(CD4)試劑盒
米串珠鐮孢環(huán)磷酸腺苷調(diào)節(jié)鳥嘌呤核苷酸交換因子1抗體Human DSCAM (Down syndrome cell adhesion molecule homolog) ELISA KIT犬CD31分子(CD31)試劑盒
灰平鏈霉菌磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體Human EDARADD (Ectodysplasin-A receptor-associated adapter protein) ELISA KIT犬CC趨化因子受體2(CCR2)試劑盒
水貂源性成分檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
磷酸化組蛋白去乙?;?/span>3抗體Secretin receptor/FITC 熒光素標(biāo)記分泌素受體抗體IgG
組蛋白H2B抗體SEL1L/FITC 熒光素標(biāo)記SEL1L抗體IgG
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。