使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 狐貍源性檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
規(guī)格: 48T 0.2PCR管
貨號:BH-P64190
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異??與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
釀酒酵母烯酰輔酶A水合酶1抗體Human SARDH(Sarcosine dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit犬間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒
大腸埃希菌烯酰輔酶A水合酶含結構域蛋白2抗體Human HHAT (Protein-cysteine N-palmitoyltransferase HHAT) ELISA KIT犬維生素K1(VK1)試劑盒
德爾布有孢酵母腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體Human GSKIP (GSK3-beta interaction protein) ELISA KIT犬維生素E(VE)試劑盒
乳桿菌屬自身抗原EDC4抗體Human GAPVD1 (GTPase-activating protein and VPS9 domain-containing protein 1) ELISA KIT犬維生素A(VA)試劑盒
盤多毛孢菌E3泛素蛋白連接酶EDD抗體Human GNMT(Glycine N-methyltransferase) ELISA Kit犬透明質(zhì)酸酶4(HAase 4)試劑盒
滑假絲酵母胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體Human GVINP1 (Interferon-induced very large GTPase 1) ELISA KIT犬透明質(zhì)酸酶3(HAase 3)試劑盒
松木層孔菌轉錄接頭蛋白EP300抗體Human GARNL3 (GTPase-activating Rap/Ran-GAP domain-like protein 3) ELISA KIT犬透明質(zhì)酸酶2(HAase 2)試劑盒
變化賴氨酸芽孢桿菌內(nèi)皮脂肪酶抗體Human GDA (Guanine deaminase) ELISA KIT犬透明質(zhì)酸酶1(HAase 1)試劑盒
枯草芽孢桿菌MYC啟動子結合蛋白1抗體Human GP2 (Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2) ELISA KIT犬透明質(zhì)酸(HA)試劑盒
硫磺絢孔菌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體Human GNL3 (Guanine nucleotide-binding protein-like 3) ELISA KIT犬特殊基團成分(維生素D結合蛋白)(GC)試劑盒
釀酒酵母烯脂酰輔酶A水解酶抗體Human GPM6B (Neuronal membrane glycoprotein M6-b) ELISA KIT犬髓過氧化物酶(MPO)試劑盒
臺灣幾丁質(zhì)單胞菌磷酸化4E結合蛋白1抗體Human COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) ELISA KIT犬松弛肽/松弛素(RLN)試劑盒
貝萊斯芽胞桿菌三羥酰輔酶A脫氫酶抗體Human GPIHBP1 (Glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1) ELISA KIT犬水通道蛋白5(AQP5)試劑盒
*美味牛肝菌限制過度增殖相關蛋白EML4抗體Human GNL3L (Guanine nucleotide-binding protein-like 3-like protein) ELISA KIT犬雙氫睪酮(DHT)試劑盒
發(fā)酵性酵母ETS1相關蛋白2抗體Human GMPR2 (GMP reductase 2) ELISA KIT犬視黃結合蛋白4(RBP-4)試劑盒
亞美尼亞固氮菌EFHA1蛋白抗體Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit犬生長(GH)試劑盒
狐貍源性檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
人類狀瘤病33 E6蛋白抗體Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC 熒光素標記磷酸化S6核糖體蛋白抗體IgG
Beta氨己糖苷酶beta亞蛋白A鏈抗體S100B/FITC 熒光素標記S100B蛋白抗體IgG
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。