產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
規(guī)格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
貨號:BH-P64169
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
盾形環(huán)柄菇磷酸化動力相關(guān)蛋白1抗體Human PITPNC1 (Cytoplasmic phosphatidylinositol transfer protein 1) ELISA KIT人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)試劑盒
西瓜枯萎病菌(可訂)DNA連接酶4抗體Human PTDSS1 (Phosphatidylserine synthase 1) ELISA KIT人Seryl- tRNA合成酶,質(zhì)(SARS/SERS)試劑盒
大腸埃希氏桿菌二肽基肽酶6抗體Human NAGA(Alpha-N-acetylgalactosaminidase) ELISA Kit人Salusin Beta(Salusin β)試劑盒
側(cè)耳二氫葉酸還原酶抗體Human CACNA1A(Voltage-dependent P/Q-type calcium channel subunit alpha-1A) ELISA Kit人Salusin Alpha(Salusin α)試劑盒
枯草芽孢桿菌有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體Human NKAP(NF-kappa-B-activating protein) ELISA Kit人SAA/LDL復(fù)合物 試劑盒
蓖麻油鑒別試劑有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體Human PTDSS1 (Phosphatidylserine synthase 1) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白P(S100P)試劑盒
紅淡紫灰鏈霉菌DOM3Z蛋白抗體Human PCID2 (PCI domain-containing protein 2) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒
麥芽糖假絲酵母蓬亂蛋白2抗體Human PDIK1L (Serine/threonine-protein kinase PDIK1L) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)試劑盒
臺灣無色需堿菌磷酸化蓬亂蛋白2抗體Human PELI3 (E3 ubiquitin-protein ligase pellino homolog 3) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)試劑盒
細(xì)鏈格孢轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體Human MYH11(Myosin-11) ELISA Kit人S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)試劑盒
葉生布勒擔(dān)子酵母脫氫酶/還原酶家族成員2抗體Human PROCA1 (Protein PROCA1) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)試劑盒
谷氨酸棒桿菌牙本質(zhì)磷蛋白抗體Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)試劑盒
大腸埃希氏菌Dermokine β蛋白抗體Human PPP1R13B (Apoptosis-stimulating of p53 protein 1) ELISA KIT人RNA結(jié)合蛋白FUS(FUS/TLS)試劑盒
柔嫩艾美耳球蟲DPCR1蛋白抗體Human POMK (Protein O-mannose kinase) ELISA KIT人Rho家族GTP酶1(RND1)試劑盒
Methylobacterium variabile表皮源性蛋白6抗體Human PKN1 (Serine/threonine-protein kinase N1) ELISA KIT人Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)試劑盒
金耳雙特異性蛋白磷酸酶7抗體Human METRN(Meteorin) ELISA Kit人Rho GDP解離抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)試劑盒
單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)組蛋白去化酶JARID2抗體番瀉葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers, sodium salts)
JAK和微管相互作用蛋白2抗體(JAK和微管相互作用蛋白2)翻白草(標(biāo)準(zhǔn)品) Valinomycin
活化蛋白激酶B抗體反式茴香腦 5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole
磷化蛋白酪氨激酶JAK-2抗體返魂草(麻葉千里光)(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium glycodeoxycholate
凋亡**受體抗體芳樟(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium taurochenodeoxycholate
磷化原癌因c-Jun抗體防風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品) glycodeoxycholicacid
Notch配體Jagged 2蛋白抗體防己諾林(標(biāo)準(zhǔn)品) Tunicamycin
組蛋白去化Jarid1C抗體防已(標(biāo)準(zhǔn)品) Scopolamine methyl bromide
組蛋白去轉(zhuǎn)移酶JMJD1B抗體飛龍掌血根皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium deoxycholate
谷氨酸脫羧酶-65抗體Phospho-Raptor (Ser792) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體IgG
谷氨酸脫羧酶-65抗體(C端)RASSF1A/FITC 熒光素標(biāo)記Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體IgG