使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 南芥菜花葉病毒(ArMV)RNA檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
規(guī)格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
貨號(hào):BH-P64162
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
Deinococcus癌中心體相關(guān)蛋白抗體Human VIMP (Selenoprotein S) ELISA KIT人γ氨基丁酸(GABA)試劑盒
藤黃孢鏈霉菌DCAF13蛋白抗體Human RUNDC1 (RUN domain-containing protein 1) ELISA KIT人β-轉(zhuǎn)導(dǎo)素重復(fù)序列包含蛋白(BTRC)試劑盒
異硫霉素鏈霉菌原鈣粘蛋白16抗體Human S100PBP (S100P-binding protein) ELISA KIT人β抑制蛋白2(ARRB2)試劑盒
哈氏木霉雌受體相關(guān)蛋白α抗體Human MSRB1 (Methionine-R-sulfoxide reductase B1) ELISA KIT人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒
新月彎孢DPY19L2蛋白抗體Human SAC3D1 (SAC3 domain-containing protein 1) ELISA KIT人β素(BTC)試劑盒
新城疫病二氫嘧啶脫氫酶抗體Human SAV1 (Protein salvador homolog 1) ELISA KIT人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)試劑盒
馬克斯克魯維酵母保加利亞變種短粗矮胖19蛋白樣1抗體Human BRCA2(Breast cancer type 2 susceptibility protein) ELISA Kit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)試劑盒
異常威克漢姆酵母DPY19L4蛋白抗體Human SDS (L-serine dehydratase/L-threonine deaminase) ELISA KIT人β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)試劑盒
地衣芽孢桿菌二肽基肽酶9抗體Human STYX (Serine/threonine/tyrosine-interacting protein) ELISA KIT人β乳糖蛋白抗體IgG 試劑盒
栗疫病菌二肽基肽酶8抗體Human NIM1K (Serine/threonine-protein kinase NIM1) ELISA KIT人β羥丁酸(β-OHB)試劑盒
黃赭色鏈霉菌多巴受體D4抗體Human SSR3 (Translocon-associated protein subunit gamma) ELISA KIT人β葡萄糖酸苷酶(βGD)試劑盒
草假單胞菌DQX1蛋白抗體Human SIGIRR (Single Ig IL-1-related receptor) ELISA KIT人β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)試劑盒
啤酒酵母三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體Human PGAM5 (Serine/threonine-protein phosphatase PGAM5, mitochondrial) ELISA KIT人β萘酚(β-naphthol)試劑盒
植物乳桿菌磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體Human SSBP2 (Single-stranded DNA-binding protein 2) ELISA KIT人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒
杏鮑菇閱讀障礙相關(guān)蛋白DLX2抗體Human NEMF (Nuclear export mediator factor NEMF) ELISA KIT人β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒
釀酒酵母肌營(yíng)養(yǎng)蛋白α抗體Human RRM2B(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2 B) ELISA Kit人β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)試劑盒
南芥菜花葉病毒(ArMV)RNA檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?棕櫚酯Human
棕櫚異酯Human, Mouse, Rat
(-)-3-萜Human
(-)-薄荷Human, Mouse
(-)-紫蘇Human
(+)-α-[1-(二氨)乙]苯Human
(+)-薄荷Human
(+)-小茴香Human, Mouse
(+)-紫蘇Human
磷酸化G蛋白通路抑制蛋白1抗體Rabbit human sIgA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人分泌型IgA抗體
腦糖原磷酸化酶抗體Rabbit -mouse IgA/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記兔抗小鼠IgA抗體
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。