產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 油菜內(nèi)源基因檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
規(guī)格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
貨號:BH-P64154
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
茄鏈格孢死亡相關(guān)蛋白3抗體Human WDTC1 (WD and tetratricopeptide repeats protein 1) ELISA KIT人酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)試劑盒
周雄腐霉防御素α6抗體Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT人酮(MGO)試劑盒
哈茨木霉S期激酶活化蛋白DBF4B抗體Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit人二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)試劑盒
水生拉恩氏菌脫氧胞苷激酶抗體Human UXS1 (UDP-glucuronic acid decarboxylase 1) ELISA KIT人二(MDA)試劑盒
粉紅單端孢短鏈脫氫還原酶3抗體Human UFL1 (E3 UFM1-protein ligase 1) ELISA KIT人氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)試劑盒
HomoserinimonasDNA聚合酶θ/DNA pol θ抗體Human CHIT1(Chitotriosidase-1) ELISA Kit人別孕烯酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)試劑盒
黃曲霉DENN域內(nèi)含蛋白2D抗體Human WDYHV1 (Protein N-terminal glutamine amidohydrolase) ELISA KIT人表皮活化肽因子(CAPF)試劑盒
枯草芽孢桿菌肌相關(guān)蛋白DAG1抗體Human WRAP73 (WD repeat-containing protein WRAP73) ELISA KIT人表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7(EGFL7)試劑盒
芽胞桿菌屬磷酸化肌相關(guān)蛋白DAG1抗體Human URGCP (Up-regulator of cell proliferation) ELISA KIT人表皮生長因子受體2(sp185/Her2)試劑盒
米根霉磷酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體Human TAP2 (Antigen peptide transporter 2) ELISA KIT人表皮生長因子受體(EGFR)試劑盒
念珠狀諾卡氏菌磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT人表皮生長因子(EGF)試劑盒
黃暗色鏈霉菌磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit人表睪酮試劑盒
解淀粉芽孢桿菌磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體Human TRIO (Triple functional domain protein) ELISA KIT人表達(dá)于SiSo系的受體結(jié)合型腫瘤抗原(RCAS1)試劑盒
球孢白僵菌磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human HADHB (Trifunctional enzyme subunit beta, mitochondrial) ELISA KIT人變腎上腺素(MN)試劑盒
土曲霉金色變種磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human TCHHL1 (Trichohyalin-like protein 1) ELISA KIT人鞭毛蛋白(flagellin)試劑盒
黑根霉磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human TRMU (Mitochondrial tRNA-specific 2-thiouridylase 1) ELISA KIT人臂板蛋白4C(Sema 4C)試劑盒
油菜內(nèi)源基因檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
自然銅(醋煅)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
棕櫚(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
棕矢車菊素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
走馬胎(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
祖師麻(唐古特瑞香)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
鉆山風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
醉椒素Human, Mouse
醉魚草皂苷IVb(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
神經(jīng)膠質(zhì)蛋白(肝癌相關(guān)因2)抗體P-selectin/CD62p /FITC 熒光素標(biāo)記P選擇素抗體IgG
糖蛋白磷脂酶D抗體Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化突觸后密度蛋白95抗體IgG