產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: Cry1A(b/c)基因檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>
規(guī)格: 48T 0.1PCR管/48T 0.2PCR管
貨號(hào):BH-P64116
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異???與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
枯草芽孢桿菌6號(hào)染色體開放閱讀框199抗體Human WNT2(Protein Wnt-2) ELISA Kit人抗EB病抗體(EBV)試劑盒
總狀毛霉7號(hào)染色體開放閱讀框34抗體Human WWC1(Protein KIBRA) ELISA Kit人抗E3泛素蛋白連接酶TRIM21(TRIM21)抗體試劑盒
新疆鹽地桿菌6號(hào)染色體開放閱讀框201抗體Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit人抗DNA酶B抗體(anti-DNase B Ab)試劑盒
鏈球菌屬6號(hào)染色體開放閱讀框203抗體Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)試劑盒
微白螺孢菌6號(hào)染色體開放閱讀框204抗體Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit人抗BB抗體(BB-Ab)試劑盒
細(xì)鏈格孢6號(hào)染色體開放閱讀框206抗體Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM)試劑盒
黑曲霉6號(hào)染色體開放閱讀框211抗體Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)試劑盒
煙曲霉6號(hào)染色體開放閱讀框225抗體Human LYPD3(Ly6/PLAUR domain-containing protein 3) ELISA Kit人軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)試劑盒
乳桿菌屬6號(hào)染色體開放閱讀框25抗體Human MAP1LC3A(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A) ELISA Kit人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結(jié)合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)試劑盒
側(cè)耳6號(hào)染色體開放閱讀框35抗體Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit人卷曲蛋白8(FZD8)試劑盒
戴爾根霉6號(hào)染色體開放閱讀框52抗體Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit人聚集蛋白(Agrin)試劑盒
第三梭菌6號(hào)染色體開放閱讀框57抗體Human MAP1LC3B(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3B) ELISA Kit人巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒
棒曲霉6號(hào)染色體開放閱讀框58抗體Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)試劑盒
毛木耳6號(hào)染色體開放閱讀框62抗體Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒
銅綠假單胞菌6號(hào)染色體開放閱讀框70抗體Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒
大腸埃希氏桿菌6號(hào)染色體開放閱讀框72抗體Human FOLR2(Folate receptor beta) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)試劑盒
Cry1A(b/c)基因檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>珠蛋白1抗體牡丹皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Saikosaponin B2
肌球蛋白輕鏈9抗體牡丹皮苷C Saikosaponin C
磷化肌球蛋白輕鏈9抗體牡荊素(標(biāo)準(zhǔn)品) Saikosaponian D
NADH復(fù)合體1抗體牡荊素-4''-O-葡萄糖苷 Hederagenin
癌相關(guān)抗原抗體牡荊素葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Hederagenin
組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶MOF抗體牡荊素鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Epimedin A
間質(zhì)蛋白抗體木鱉子(標(biāo)準(zhǔn)品) Epimedin A1
肌球蛋白輕鏈3抗體木芙蓉葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Epimedin B
多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體木瓜(標(biāo)準(zhǔn)品) Epmedin C
甘油激酶3抗體p-PKC/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶C抗體IgG
高爾體磷蛋白3樣蛋白抗體p-PKC beta 1/2/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶C β1/β2抗體IgG