使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 鏈球菌屬通用PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BH-P63391
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則??。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
17b-hydroxyandrost-4-ene-3-...英文名稱: OxaliplatinCD163蛋白樣1抗體包裝1mg
17α-Methyltestosterone(標準品)英文名稱: Oxiconazole Nitrate周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體包裝1g
1,3-(標準品)英文名稱: Oxytetracycline HCl22號染色體開放閱讀框31抗體包裝250mg
1,6-二氫-2-基-6-氧代-(3,4’-二吡啶)...英文名稱: Oxytetracycline HCl分裂周期37樣蛋白1抗體包裝1g
2,3,4-三氧基苯(標準品)英文名稱: Oxytocin Acetate羧肽酶X(M14家族1)抗體包裝250mg
2,3,4-三氧基苯(標準品)英文名稱: Paclitaxel卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體包裝100g
2,3,4-三氧基苯酸(標準品)英文名稱: Paclitaxel跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體包裝25g
2,3-丁二酮(標準品,≥99.0%(GC))英文名稱: Palonosetron HCl分子伴侶CESK1蛋白抗體包裝500g
2,3-二氫-6-苯基咪唑【2,1-b】噻唑鹽酸鹽(鹽...英文名稱: Paromomycin Sulfate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體包裝5g
2,6-二(標準品)英文名稱: Paromomycin SulfateCDK5激活結(jié)合蛋白1抗體包裝100g
2,6-二基酚(標準品)英文名稱: Pazufloxacin Mesilate磷酸化表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體包裝25g
2-(4-異丁酰苯基)酸(標準品)英文名稱: Pazufloxacin Mesilate腫瘤/抗原1B/1A包裝25g
2-氨基-4-苯酚(標準品)英文名稱: Pefloxacin mesylate dihydrate磷酸化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
2-苯乙酰(標準品)英文名稱: Pefloxacin mesylate dihydrate跨膜蛋白12抗體包裝1g
2-單硝酸異山梨酯(標準品)英文名稱: Pemetrexed Disodium球蛋白超家族成員16抗體包裝250mg
鏈球菌屬通用PCR試劑盒MYO6 Antibody洋蔥伯克霍爾德菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
MYO1G Antibody球孢白僵菌用途: 生物防治
MYO9B Antibody蘑菇假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas agarici
MYOM1 Antibody大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
MYOD1 Antibody木豆根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
MYOZ2 Antibody土地桿菌屬拉丁屬名: Pedobacter kyungheensis
MYOM2 Antibody仙人掌有孢漢遜酵母拉丁屬名: Hanseniaspora opuntiae
MYSM1 Antibody硬黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
MZB1 Antibody細鏈格孢拉丁屬名: Alternaria tenuissima
MZF1 Antibody無色殼囊孢用途: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。