使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 支氣管敗血波氏桿菌(博德特氏桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BH-P63359
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
α-胞襯蛋白(SPTAN1)檢測試劑盒英文名稱:SPTAN1 ELISA Kit鈣連蛋白抗體包裝500g
α白蛋白(AFM)檢測試劑盒英文名稱:AFM ELISA Kit二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白2抗體包裝50mg
α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)檢測試劑盒英文名稱:α2PI ELISA Kit色素P450ⅡE1抗體包裝1g
α2-巨球蛋白(α2M)檢測試劑盒英文名稱:α2M ELISA Kit趨化因子受體1抗體包裝100g
α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒英文名稱:αHSG ELISA Kit磷酸化原癌基因c-Raf抗體包裝25g
α1-微球蛋白(α1M)檢測試劑盒英文名稱:α1M ELISA Kit磷酸化致癌基因C-Myc抗體包裝500g
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)檢測試劑盒英文名稱:α1AGP ELISA KitCD33抗體包裝1g
α1-抗胰蛋白酶(α1AT)檢測試劑盒英文名稱:α1AT ELISA Kit磷酸化原癌基因c-kit抗體包裝5g
Zeste同源物增強(qiáng)子1(EZH1)檢測試劑盒英文名稱:EZH1 ELISA Kit磷酸化原癌基因c-Jun抗體包裝1g
YY肽(PYY)檢測試劑盒英文名稱:PYY ELISA Kit離子通道蛋白3抗體包裝25g
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)檢測試劑盒英文名稱:XRCC6 ELISA Kit磷酸化周期素E抗體包裝5g
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白5(XRCC5)檢測試劑盒英文名稱:XRCC5 ELISA Kit磷酸化分裂周期蛋白25C抗體包裝250mg
X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)檢測試劑盒英文名稱:XBP1 ELISA Kit磷酸化周期素依賴性激酶9抗體包裝1g
Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)檢測試劑盒英文名稱:WFS1 ELISA Kit磷酸化Connexin 43蛋白抗體包裝5g
WNT1誘導(dǎo)信號通道蛋白1(WISP1)檢測試劑盒英文名稱:WISP1 ELISA Kit絲切蛋白抗體包裝100g
支氣管敗血波氏桿菌(博德特氏桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒LAMA1 Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
LAMB1 Antibody指狀游動放線菌拉丁屬名: Actinoplanes digitatis
LAMB2 Antibody蘋果盤二孢菌*用途: 植物病原物,用于該病的防治研究
LAMB3 Antibody鏈格孢用途: 植物病原物,用于該菌種群遺傳學(xué)研究
LAMP3 Antibody解淀粉芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
LATS1 Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
LATS1 Antibody蘇云金芽孢桿菌莫里遜亞種注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
LAMC3 Antibody赤紅球菌拉丁屬名: Rhodococcus ruber
LDLRAD1 AntibodyPseudohaliea rubra拉丁屬名: Pseudohaliea rubra
LDB2 Antibody尤韋可擬盤多毛孢拉丁屬名: Pestalotiopsis uvicola
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。