使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 非洲馬瘟病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BH-P63350
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
成纖維細(xì)胞生長因子受體1(FGFR1)檢測試劑盒英文名稱:FGFR1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白157抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞生長因子7(FGF7)檢測試劑盒英文名稱:FGF7 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90B抗體包裝10MG
成纖維細(xì)胞生長因子3(FGF3)檢測試劑盒英文名稱:FGF3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體包裝25g
成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF23)檢測試劑盒英文名稱:FGF23 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞生長因子18(FGF18)檢測試劑盒英文名稱:FGF18 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝1g
成纖維細(xì)胞生長因子15(FGF15)檢測試劑盒英文名稱:FGF15 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體包裝25g
成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF13)檢測試劑盒英文名稱:FGF13 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞生長因子12(FGF12)檢測試劑盒英文名稱:FGF12 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白107抗體包裝1g
成纖維細(xì)胞生長因子11(FGF11)檢測試劑盒英文名稱:FGF11 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白18抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞激活蛋白α(FAPα)檢測試劑盒英文名稱:FAPα ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白56抗體包裝1g
沉默調(diào)節(jié)蛋白6(SIRT6)檢測試劑盒英文名稱:SIRT6 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白116抗體包裝5g
沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)檢測試劑盒英文名稱:SIRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白117抗體包裝1g
超氧化物歧化酶1(SOD1)檢測試劑盒英文名稱:SOD1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體包裝100g
腸型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP2)檢測試劑盒英文名稱:FABP2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138抗體包裝25g
叉頭框蛋白P3(FOXP3)檢測試劑盒英文名稱:FOXP3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144NL抗體包裝5g
非洲馬瘟病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒KH5 Antibody燕麥鐮孢拉丁屬名: Fusarium avenaceum
KH7 Antibody產(chǎn)黃纖維單胞菌用途: 利用纖維素能力強(qiáng)
KIP1 Antibody碳樣小單孢菌拉丁屬名: Micromonospora carbonacea
KIP3 Antibody轉(zhuǎn)因玉米NK603質(zhì)粒分子標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)拉丁屬名: GBW10086
KJ10 Antibody蘇云金芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
KIP3 Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
KJ16 Antibody乳乳球菌乳亞種拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp.lactis
KJ16 Antibody塔賓曲霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
KJ2 Antibody嗜冷希瓦氏菌拉丁屬名: Shewanella psychrophila
KJ2 Antibody土地桿菌拉丁屬名: Pedobacter sp.
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。