使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng): 苜蓿黃萎病菌PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號(hào):BH-P63338
公司產(chǎn)品僅用于科研分類(lèi):熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則??。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
胱天蛋白酶11(CASP11)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):CASP11 ELISA KitC型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體包裝25mg
胱天蛋白酶1(CASP1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):CASP1 ELISA KitCD226抗體包裝25g
胱硫醚β合酶(CβS)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):CβS ELISA KitCD26抗體包裝5g
骨形成蛋白8B(BMP8B)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMP8B ELISA Kit球蛋白G Fc段受體Ⅱ/Fc γ RII a抗體包裝5g
骨形成蛋白6(BMP6)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMP6 ELISA Kit緊密連接蛋白20抗體包裝1g
骨形成蛋白1(BMP1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMP1 ELISA Kit中心體蛋白135抗體包裝5g
骨骼肌特異性受體酪氨酸激酶(MUSK)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):MUSK ELISA Kit半胱酸蛋白酶蛋白-7抗體包裝100g
骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):TNNT1 ELISA Kit鈣調(diào)節(jié)素抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)素)包裝10g
骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):TNNI2 ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框181抗體包裝25g
骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):OC ELISA KitⅠ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)包裝25mg
骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMPRⅡ ELISA Kit8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體包裝1g
骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMPR1A ELISA Kit結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體包裝5g
骨成型蛋白7(BMP7)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMP7 ELISA Kit色素P450 2C9抗體包裝10MG
骨成型蛋白4(BMP4)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMP4 ELISA Kit色素P450 2D6抗體包裝100g
骨成型蛋白2(BMP2)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):BMP2 ELISA Kit血小板活化因子CTR9抗體包裝25g
苜蓿黃萎病菌PCR試劑盒IFNW1 Antibody枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
IFRD1 Antibody短莖青霉拉丁屬名: Penicillium brevistipitatum
IGF1R Antibody迷宮栓孔菌拉丁屬名: Trametes gibbosa
IFNL2 Antibody頂孢頭孢霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
IGFBP3 Antibody微小桿菌拉丁屬名: Microvirga sp.
IGFN1 Antibody枯草芽胞桿菌用途: 產(chǎn)蛋白酶
IGHA1 Antibody拉丁屬名: Bacillus aryabhattai Shivaji et al.
IGHD Antibody乳桿菌屬拉丁屬名: Lactobacillus sp.
IGHG1 Antibody淺綠黃假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas viridiflava
IGHM Antibody疣梗青霉拉丁屬名: Penicillium verrucosum
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。