使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產品參數:
產品名稱: 梨火疫病PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BH-P63327
公司產品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的**量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
細胞抗原75(LY75)檢測試劑盒英文名稱:LY75 ELISA Kit胰羧肽酶A1抗體包裝5g
細胞功能關聯抗原2(LFA2)檢測試劑盒英文名稱:LFA2 ELISA Kit羧肽酶A2抗體包裝1g
β(LTβ)檢測試劑盒英文名稱:LTβ ELISA Kit腦源性球蛋白超家族蛋白3抗體包裝250mg
亮氨酸豐富重復LGI家族成員3(LGI3)檢測試劑盒英文名稱:LGI3 ELISA Kit胰羧肽酶B1抗體包裝5g
亮氨酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)檢測試劑盒英文名稱:LRG1 ELISA Kit維酸結合蛋白2抗體包裝1g
連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)檢測試劑盒英文名稱:CTNNβ1 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框80抗體包裝1g
粒細胞趨化蛋白2(GCP2)檢測試劑盒英文名稱:GCP2 ELISA Kit磷酸化CD32B抗體包裝250mg
類胰蛋白酶(TPS)檢測試劑盒英文名稱:TPS ELISA Kit過敏素C3(補體C3)抗體包裝5g
類固醇5α還原酶1(SRD5α1)檢測試劑盒英文名稱:SRD5α1 ELISA Kit癌胚抗原相關粘附分子抗體包裝10mg
蘭尼定受體1(RYR1)檢測試劑盒英文名稱:RYR1 ELISA Kit質多聚腺苷酸結合蛋白1抗體包裝1g
賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測試劑盒英文名稱:LOXL2 ELISA Kit半胱氨酸蛋白酶抑制劑7抗體包裝25g
賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)檢測試劑盒英文名稱:LOXL1 ELISA Kit22號染色體開放閱讀框29抗體包裝5g
賴氨酰氧化酶(LOX)檢測試劑盒英文名稱:LOX ELISA Kit神經表面蛋白F3包裝1g
賴氨酸tRNA合成酶(KARS)檢測試劑盒英文名稱:KARS ELISA Kit組織蛋白酶C抗體包裝5g
醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒英文名稱:NQO1 ELISA Kit半胱酸蛋白酶蛋白-4抗體包裝100g
梨火疫病PCR試劑盒HDAC2 Antibody多主枝孢拉丁屬名: Cladosporium herbarum (Persoon) Link et Fries
HDAC1 Antibody淡紫灰鏈霉菌用途: 代謝產物具有**活性。
HDAC4 Antibody枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
HDAC10 Antibody黃褐環(huán)銹傘拉丁屬名: Pholiota spumosa
HDAC5 Antibody大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
HDAC5 Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
HDAC5 Antibody鹽田鹽單胞菌拉丁屬名: Halomonas campisalis
HDAC7 Antibody大豆慢生根瘤菌用途: 與大豆共生固氮
HDGFL3 Antibody黃曲霉拉丁屬名: Aspergillus flavus
HELZ2 Antibody大腸埃希菌拉丁屬名: coli
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。