使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 雞源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
規(guī)格: 50次
貨號:BH-P63280
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則???。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
CD30分子(CD30)檢測試劑盒英文名稱:CD30 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝1g
CD19分子(CD19)檢測試劑盒英文名稱:CD19 ELISA KitB轉(zhuǎn)錄激活因子抗體包裝250mg
CC趨化因子受體6(CCR-6)檢測試劑盒英文名稱:CCR-6 ELISA KitBCL6B抗體包裝5g
cAMP反應元件結(jié)合蛋白(CREB)檢測試劑盒英文名稱:CREB ELISA KitBAP31蛋白抗體包裝1g
Ca-ATP酶(Ca-ATPase)檢測試劑盒英文名稱:Ca-ATPase ELISA Kit支鏈氨基酸轉(zhuǎn)氨酶2抗體包裝1g
B因子(BF)檢測試劑盒英文名稱:BF ELISA KitBCL2相關蛋白A1抗體包裝250mg
B細胞瘤因子2(Bcl-2)檢測試劑盒英文名稱:Bcl-2 ELISA KitB瘤蛋白3抗體包裝5g
B細胞瘤-XL(Bcl-xl)檢測試劑盒英文名稱:Bcl-xl ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子MYB相關蛋白B抗體包裝1g
B細胞活化因子(BAFF)檢測試劑盒英文名稱:BAFF ELISA Kit防御素β1/Defensin β1抗體包裝25g
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白(Bid)檢測試劑盒英文名稱:Bid ELISA KitB活化因子受體抗體包裝5g
Bcl-2相關X蛋白(BAX)檢測試劑盒英文名稱:BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗體包裝1g
Apelin 13(AP13)檢測試劑盒英文名稱:AP13 ELISA Kit蛇巴曲酶抗體包裝5g
apelin 12(AP12)檢測試劑盒英文名稱:AP12 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝100g
Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)檢測試劑盒英文名稱:Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配體1抗體包裝25g
Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)檢測試劑盒英文名稱:PⅢP ELISA KitB7-H4抗體包裝1g
雞源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒EFNA3 Antibody褐色諾卡氏菌拉丁屬名: Nocardia fusca
EFNB1 Antibody北方蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
EFNA4 Antibody枝孢屬拉丁屬名: Cladosporium sp.
EFTUD2 Antibody大腸桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
EFNB2 Antibody產(chǎn)紅青霉拉丁屬名: Penicillium rubens
EFNB3 Antibody草青霉拉丁屬名: Penicillium oxalicum
EGF Antibody蠟狀芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
EGR3 Antibody丁香葉點霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
EGFR Antibody微紫青霉拉丁屬名: Penicillium janthinellum
EHHADH Antibody臺灣根霉拉丁屬名: Rhizopus formosensis Nakazawa
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。