使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 質(zhì)粒PET32a
規(guī)格: 2μg
貨號:BH-P63271
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:DNA提取試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
白介素13(IL-13)檢測試劑盒英文名稱:IL-13 ELISA Kit脂肪炎癥因子Apelin抗體包裝25g
白介素12(IL-12)檢測試劑盒英文名稱:IL-12 ELISA Kit氫ATP酶通道蛋白抗體包裝5g
白介素11(IL-11)檢測試劑盒英文名稱:IL-11 ELISA KitATP5A抗體包裝25g
白介素10(IL-10)檢測試劑盒英文名稱:IL-10 ELISA Kit即刻早期基因ARC抗體包裝5g
白介素10(IL-10)檢測試劑盒英文名稱:IL-10 ELISA KitADP核糖基化因子6抗體包裝5g
白介素1(IL-1)檢測試劑盒英文名稱:IL-1 ELISA Kit芳香化酶抗體包裝1g
白介素1(IL-1)檢測試劑盒英文名稱:IL-1 ELISA KitArtemin抗體包裝25g
白蛋白(albumin)檢測試劑盒英文名稱:albumin ELISA Kitalpha 1腎上腺素能受體A抗體包裝5g
白蛋白(ALB)檢測試劑盒英文名稱:ALB ELISA Kit血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體包裝1g
胺氧化酶(含黃素)A(MAOA)檢測試劑盒英文名稱:MAOA ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體包裝5g
癌胚抗原(CEA/CD66)檢測試劑盒英文名稱:CEA/CD66 ELISA Kit血管緊縮素樣蛋白1抗體包裝250mg
癌胚抗原(CEA)檢測試劑盒英文名稱:CEA ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白7抗體包裝1g
阿立新A(Orexin A)檢測試劑盒英文名稱:Orexin A ELISA Kit炭疽素受體2抗體包裝1g
γ突觸核蛋白(SNCG)檢測試劑盒英文名稱:SNCG ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝5g
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)檢測試劑盒英文名稱:IFI16/p16 ELISA Kit自噬蛋白5/凋亡的特異性蛋白抗體包裝5g
質(zhì)粒PET32aDLEC1 Antibody洋蔥伯克霍爾德菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
DLG2 Antibody 谷氨棒桿菌 拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
DLEU7 Antibody鐮刀菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
DLGAP1 Antibody海膽橙色小單孢菌拉丁屬名: Micromonospora echinaurantiaca
DLGAP5 Antibody土壤短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas terrae
DLGAP5 Antibody瓦尼針層孔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
DLL4 Antibody大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
DLX3 Antibody南方菌寄生菌拉丁屬名: Hypomyces australis
DLK1 Antibody德干高原鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces deccanensis
DMAC2L Antibody鐮孢屬拉丁屬名: Fusarium sp.
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。