產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 3'RACE試劑盒
規(guī)格: 10次
貨號:BH-P63264
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:DNA提取試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚??酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
促狀腺(TSH)檢測試劑盒英文名稱:TSH ELISA Kit腺苷酸環(huán)化酶10抗體包裝5g
促黃體(LH)檢測試劑盒英文名稱:LH ELISA Kit腺苷酸環(huán)化酶5抗體包裝25g
促紅細胞**素(EPO)檢測試劑盒英文名稱:EPO ELISA Kit腺苷酸環(huán)化酶6抗體包裝5g
雌三醇(E3)檢測試劑盒英文名稱:E3 ELISA Kit腺苷酸環(huán)化酶9抗體包裝5g
雌硫酸轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)檢測試劑盒英文名稱:SULT1E1 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號染色體)抗體包裝1g
雌(E)檢測試劑盒英文名稱:E ELISA Kit三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體包裝5g
雌二醇受體(ER)檢測試劑盒英文名稱:ER ELISA Kitβ淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體包裝25g
雌二醇(E2)檢測試劑盒英文名稱:E2 ELISA Kit內(nèi)收蛋白a1抗體包裝5g
垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)檢測試劑盒英文名稱:PACAP ELISA Kitα2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體包裝100ml
垂草扁桃酸(VMA)檢測試劑盒英文名稱:VMA ELISA Kit膜粘連蛋白7抗體包裝25ml
穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)檢測試劑盒英文名稱:PF/PFP ELISA Kit早老素γ分泌酶抗體包裝5ml
程序性死亡1(PD-1)檢測試劑盒英文名稱:PD-1 ELISA Kit鈉ATP酶蛋白a1抗體包裝100ml
成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒英文名稱:FGF9 ELISA KitRho鳥苷酸交換因子2抗體包裝25ml
成纖維細胞生長因子8(FGF8)檢測試劑盒英文名稱:FGF8 ELISA Kit磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子6(FGF6)檢測試劑盒英文名稱:FGF6 ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶9抗體包裝25g
3'RACE試劑盒CYP4F2 Antibody中國農(nóng)大湖積物桿菌拉丁屬名: Lacibacter cauensis
CYP4Z1 Antibody克魯斯假絲酵母拉丁屬名: Candida krusei
CYP4V2 Antibody注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
CYP4X1 Antibody黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger van Tieghem
CYP8B1 Antibody枯斑擬盤多毛孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
CYTH3 Antibody暗黃紫色小單孢菌拉丁屬名: Micromonospora fulvoviolacea
CYP8B1 AntibodyHLE(人肝癌(未分化))拉丁屬名: HLE(人肝癌(未分化))
CYSLTR2 Antibody根瘤菌用途: 固氮
CYSLTR1 Antibody根瘤菌用途: 固氮
CYTIP Antibody貝氏隱飽子蟲拉丁屬名: baileyi