PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 植物專用蛋白酶抑制劑混合液,100X
規(guī)格: 1 mL
貨號:BH-P63249
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:DNA提取試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
金屬硫蛋白2(MT-2)檢測試劑盒英文名稱:MT-2 ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶12包裝250mg
金屬硫蛋白1(MT-1)檢測試劑盒英文名稱:MT-1 ELISA Kit磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體包裝5g
解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)檢測試劑盒英文名稱:ADAM9 ELISA Kit膜粘連蛋白2受體抗體包裝100ml
解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試劑盒英文名稱:ADAM8 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體包裝1g
解脲脲原體抗體(UU-Ab)檢測試劑盒英文名稱:UU-Ab ELISA KitADCK5蛋白抗體包裝5g
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)檢測試劑盒英文名稱:CNTF ELISA Kit艾滋病病復制結(jié)合蛋白抗體包裝1g
結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)檢測試劑盒英文名稱:Hpt/HP ELISA KitAFP4b蛋白抗體包裝5g
結(jié)締組織生長因子(CTGF)檢測試劑盒英文名稱:CTGF ELISA KitHIV-1病復制結(jié)合蛋白2抗體包裝100g
結(jié)蛋白(Des)檢測試劑盒英文名稱:Des ELISA Kit伴侶蛋白bc1同源復合體抗體包裝25g
窖蛋白Caveolin1(Cav-1)檢測試劑盒英文名稱:Cav-1 ELISA Kit心肌錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域1抗體包裝5g
角化細胞生長因子(KGF/FGF-7)檢測試劑盒英文名稱:KGF/FGF-7 ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝25g
角化細胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)檢測試劑盒英文名稱:AR ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g
膠原酶II(Collagenase II)檢測試劑盒英文名稱:Collagenase II ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝1g
膠原酶I(Collagenase I)檢測試劑盒英文名稱:Collagenase I ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝5g
膠原吡啶交聯(lián)(PYD)檢測試劑盒英文名稱:PYD ELISA Kit雌二抗體包裝1g
植物專用蛋白酶抑制劑混合液,100XTN2 Antibody枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
TFR Antibody地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
TN5 Antibody類干酪乳桿菌類干酪亞種拉丁屬名: Lactobacillus paracasei subsp. paracasei
TD2 Antibody嗜鹽喜鹽芽胞桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
TN6 Antibody窄食單胞菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
COL11A1 Antibody串珠鐮孢拉丁屬名: Fusarium moniliforme
COL13A1 Antibody約氏不動桿菌拉丁屬名: Acinetobacter johnsonii
TROB Antibody固氮菌用途: 固氮。
COL14A1 Antibody韓國游動微菌拉丁屬名: Planomicrobium koreense
COL16A1 Antibody單格孢屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用