產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng): 通用型蛋白酶抑制劑混合液,100X
規(guī)格: 1 mL
貨號(hào):BH-P63246
公司產(chǎn)品僅用于科研分類(lèi):DNA提取試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):PCNA ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體包裝5ml
抗胰蛋白酶(AT)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):AT ELISA Kit蛋白激酶A2抗體包裝1g
抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):PA-IgG/M/A ELISA Kit血管緊張素Ⅱ受體2抗體包裝5g
抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):ACA-IgM ELISA KitASH1蛋白抗體包裝100g
抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):ACA-IgG ELISA Kit芳香乙酰脫乙酰基酶樣蛋白2抗體包裝25g
抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):ACA-IgA ELISA Kit血管內(nèi)皮遷移蛋白抗體包裝5g
抗心肌抗體(AMA)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):AMA ELISA Kit糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體包裝100g
抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):snRNP/Sm ELISA Kit膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體包裝25g
抗線(xiàn)粒體抗體(AMA)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):AMA ELISA Kit血管**素樣蛋白3抗體包裝500g
抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):aZP-IgG ELISA Kit甘油酯激酶線(xiàn)粒體抗體包裝50MG
抗透明帶抗體(aZP)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):aZP ELISA Kit磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體包裝25ml
抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):dsDNA ELISA Kit自噬體ATG16L2蛋白抗體包裝1g
抗平滑肌抗體(ASMA)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):ASMA ELISA Kit酸性磷酸酶抗體包裝100g
抗凝血酶受體(ATR)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):ATR ELISA Kit酸性磷酸酶抗體包裝25g
抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng):AT-Ⅲ ELISA Kit光激酶A相互作用蛋白1抗體包裝25g
通用型蛋白酶抑制劑混合液,100XCMTM1 Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
CMTM1 Antibody地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
CMTM2 Antibody血紅鞘氨單胞菌拉丁屬名: Sphingomonas sanguinis
CMTM2 Antibody大腸埃希菌拉丁屬名: coli
CMTM4 Antibody德?tīng)柌加墟呓湍咐倜? Torulaspora delbrueckii
CMTM3 Antibody竹喙球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
CMTM3 Antibody敏捷食菌拉丁屬名: Acidovorax facilis,72W
CMTM5 Antibody動(dòng)性球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
CMTM6 Antibody假單胞菌用途: 微生物肥料
CMTM6 Antibody淺黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces flaveolus