產(chǎn)品參數(shù): 產(chǎn)品名稱: DNA提取試劑盒 規(guī)格: 50次 貨號:BH-P63213 公司產(chǎn)品僅用于科研分類:DNA提取試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果: 標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系: 10×擴(kuò)增緩沖液 10ul 4種dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加雙或三蒸水至 100ul PCR反應(yīng)特點(diǎn) (1) 特異性強(qiáng) PCR反應(yīng)的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合; ②堿基配對原則; ③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性; ④靶基因的特異性與保守性。 其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。 (2) 靈敏度高 PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。 (3) 簡便、快速 PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。 (4) 對標(biāo)本的純度要求低 不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
PCR反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。 設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 Reinforced Clostridial Medium人角膜上皮總RNA6-溴-2-萘酚FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor) 促卵泡受體抗原 哥倫比亞瓊脂人角膜總RNA十二羰基三釕FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡抗原 Columbia Agar人視網(wǎng)膜色素上皮總RNA十二羰基三釕GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基丁A型受體α1抗原 沙氏葡萄糖肉湯人晶狀體上皮總RNA十二羰基三釕GABAB1(GABAb Receptor 1) g-氨基丁B1受體(多肽) Sabouraud Dextrose Broth人虹膜色素上皮總RNA鐵(III) 水合物GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基丁A型受體B2抗原 沙氏葡萄糖瓊脂人結(jié)膜成纖維總RNA鉻,水合GAD-67 (glutamate decarboxylase 67) 谷氨脫羧酶-67抗原 Sabouraud Dextrose Agar人無色 Tryptic Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium)peptide 表面趨化因子受體3抗原 Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium)人絨毛間葉成纖維總RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡基)-2GATA-4(GATA binding factor 4) homeobox) differntiation factor 8) 生長分化因子8抗原 Phosphate Buffer, pH 7.2人間充質(zhì)干-脂肪總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原 緩沖-蛋白胨溶液pH7.0人間充質(zhì)干-肝臟總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 BUFFERED SOD CHLOR PEPTONE人臍帶間充質(zhì)干總RNA3-甲氧基苯GFP 綠色熒光蛋白 液體硫乙鹽培養(yǎng)基(FTM)人肺間充質(zhì)干總RNA3-甲氧基苯GFP 綠色熒光蛋白 NIH硫乙鹽肉湯人上皮總RNA3-甲氧基苯GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor) 糖皮質(zhì)**誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗原 液體A(0.1%蛋白胨水)人成纖維總RNA(基膦)金GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原 Fluid A人臍靜脈內(nèi)皮總RNA敵草胺GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽) 液體D(0.1%蛋白胨水和吐溫80)人臍動脈內(nèi)皮總RNA乙基三苯基溴化磷GLP-1 peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽) Fluid D人臍靜脈平滑肌總RNA乙基三苯基溴化磷GLP-1R peptide 胰高血糖素樣肽-1受體多肽 胰蛋白大豆肉湯人臍動脈平滑肌總RNA乙基三苯基溴化磷GLUT3(Glucose transporter 3) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗原 Tryptic Soy Broth人腦微血管內(nèi)皮微RNA2--3--5-吡GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) A33(跨膜)抗原 Bacto? Peptone人腦血管周微RNA2--4-吡glypican 1 磷脂酰基醇蛋白聚糖-1抗原 脫脂奶人脈絡(luò)叢內(nèi)皮微RNA2--4-吡GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 磷脂?;嫉鞍拙厶?3(多肽) Skim Milk人脈絡(luò)叢上皮微RNA2--4--3-甲基吡Glypican 4(Glypican proteoglycan 4) 磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原 LB肉湯,Lennox人脈絡(luò)叢成纖維微RNA2--4--3-甲基吡GRB2/ASH peptide 生長因子受體結(jié)合蛋白2抗原 LB Broth, Lennox人腦膜微RNA2--4-吡-3-甲GZMB/CCPI(Granzyme B) 顆粒酶B抗原 BactoTM瓊脂人神經(jīng)元微RNA2--4--5-甲基吡UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor:G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原 BactoTM Agar人腦顆粒微RNA2--4--5-甲基吡GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原 平板計數(shù)瓊脂人海馬趾神經(jīng)元微RNA2--4--5-甲基吡GnRHR peptide 促性受體抗原 Plate Count Agar人少突膠質(zhì)前體微RNA乙氧甲?;交寤iSS-1R/GPR54/GPCR54(KiSS-1 receptor/G-Protein Coupled Receptor 54) D/E (Dey/Engley) Neutralizing Agar人脊髓星形膠質(zhì)微RNA雙芬phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷化葡萄糖合成激酶3α/β抗原 D/E中和肉湯人海馬趾星形膠質(zhì)微RNA雙芬GSR/GRase(glutathione Nutrient Agar人表皮黑色素-中色素微RNA4-溴異喹啉H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原 麥芽浸出液瓊脂人表皮黑色素-深色素微RNA4-溴異喹啉Haase(hyaluronidase) 透明質(zhì)酶/玻璃酶抗原 Malt Extract Agar人成纖維-胎兒微RNA4-溴異喹啉HA tag HA tag標(biāo)簽多肽 Fluid Lactose Medium人成纖維-新生兒微RNA4,4′-雙(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HA tag(map) HA tag標(biāo)簽(分支多肽) Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)人成纖維-微RNA4,4′-雙(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝生長因子激活物抑制因子抗原 Baird-Parker Agar Base人毛微RNA六銠三銨HBA1(hemoglobin alpha 1) 人類血紅蛋白α1抗原 卵黃亞碲鹽增菌液人基質(zhì)微RNA3,5-二-4-基吡VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原 EY lurite Enrichment人外根殼微RNA3,5-二-4-基吡URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原 1%亞碲鹽溶液人內(nèi)根殼微RNA檸檬鎂九水合物URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病X蛋白(HBxAg)C端抗原 lurite Solution人內(nèi)皮微RNABexaroteneBeta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta) 人beta 亞基人絨毛膜促性腺抗原 L-EMB瓊脂(伊紅美藍(lán)瓊脂)人成纖維微RNA1535-65-5Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亞基人絨毛膜促性腺多肽抗原 Eosin Methylene Blue Agar, Levine人口腔角質(zhì)微RNA1535-65-5HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱腫瘤抗原 DNA提取試劑盒腦心浸液人牙齦成纖維微RNAD-薄荷CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 Brain Heart Infusion人牙周膜成纖維微RNAD-薄荷HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗體(N端) 50170人食道上皮微RNAD-薄荷HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗原(N端) 50171人食道平滑肌微RNA2-(氧基)苯胺HGF(hepatocyte growth factor) 肝生長因子抗原 50160人腸微血管內(nèi)皮微RNA2-(氧基)苯胺