產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 樣本保存液含染料(橙黃色)
規(guī)格: 2.5L
貨號(hào):BH-P63231
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:DNA提取試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
	
	
		 
	
	
		使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液   10ul
4種dNTP混合物   各200umol/L
引物   各10~100pmol
模板DNA       0.1~2ug
   Taq DNA聚合酶   2.5u
Mg2+       1.5mmol/L
加雙或三蒸水至  100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
	
	
		
PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:MPO-ANCA IgG ELISA KitADP核糖基化樣因子ARL3抗體包裝25g
	
	
		髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(MPO-ANCA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:MPO-ANCA ELISA Kit花生四烯酸15脂氧合酶1抗體包裝5g
	
	
		髓過(guò)氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒英文名稱:MPO ELISA Kit癌增強(qiáng)蛋白2抗體包裝1g
	
	
		酸性磷酸酶(ACP)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ACP ELISA Kitα1微球蛋白抗體包裝100g
	
	
		酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:aFGF/FGF-1 ELISA Kitα晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體包裝25g
	
	
		酸性β葡萄糖苷酶(GBA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GBA ELISA Kit腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝1mg
	
	
		絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1 ELISA KitAMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體包裝1g
	
	
		絲氨酸轉(zhuǎn)肽酶抑制劑Kazal type 3(SPINK3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:SPINK3 ELISA Kit致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
	
	
		絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:STK ELISA Kit腺苷脫氨酶抗體包裝5g
	
	
		通道蛋白9(AQP-9)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AQP-9 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族4抗體包裝1g
	
	
		通道蛋白5(AQP-5)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AQP-5 ELISA KitATRNL1蛋白抗體包裝25g
	
	
		通道蛋白4(AQP-4)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AQP-4 ELISA KitAFP4a蛋白抗體包裝5g
	
	
		通道蛋白3(AQP-3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AQP-3 ELISA Kit鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體包裝250mg
	
	
		通道蛋白2(AQP-2)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AQP-2 ELISA Kit鐵蛋白Fe65樣蛋白2抗體包裝25g
	
	
		通道蛋白1(AQP-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:AQP-1 ELISA Kitβ淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
樣本保存液含染料(橙黃色)CDH9 Antibody蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus
	
	
		CDH8 Antibody黑木耳注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
	
	
		CDK11B Antibody微球菌用途: 在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)中以100mg/L的鄰苯二酚為碳源培養(yǎng),3天內(nèi)降解率大于90%
	
	
		CDK1 Antibody枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
	
	
		CDK2 Antibody忠清南道鹽單胞菌拉丁屬名: Halomonas gomseomensis
	
	
		CDK20 Antibody芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus sp.
	
	
		CDK2AP1 Antibody綠木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
	
	
		CDK2AP2 Antibody慕尼黑分枝桿菌拉丁屬名: Mycobacterium monacense
	
	
		CDK2AP1 Antibody枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
	
	
		CDK5R2 Antibody豬丹絲菌拉丁屬名: rhuriopathiae