使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 精提酵母tRNA溶液B(Carrier RNA),5mg/mL
規(guī)格: 1.5 mL
貨號(hào):BH-P63226
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:DNA提取試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Cyclin-D2 ELISA KitAICAR?;D(zhuǎn)移酶抗體包裝5MG
細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Cyclin-D1 ELISA Kit磷酸化擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體包裝1g
細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:SOCS-3 ELISA KitATP5E蛋白抗體包裝250mg
細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:SOCS-1 ELISA KitATP5G2蛋白抗體包裝25g
細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ERK ELISA KitATP6V0D2蛋白抗體包裝5g
細(xì)胞色素C(Cyt-C)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Cyt-C ELISA KitATP6V1B2蛋白抗體包裝1g
細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CYFRA21-1 ELISA KitATPIF1蛋白抗體包裝5g
細(xì)胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CK 18-M65 ELISA KitAttractin蛋白抗體包裝10mg
細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CK 18-M30 ELISA Kit磷酸化有絲分裂激酶B抗體包裝50mg
細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ICAM-3/CD50 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白M1抗體包裝100mg
細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ICAM-2/CD102 ELISA KitALKB蛋白抗體包裝1g
細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ICAM-1/CD54 ELISA Kit乙酰輔酶A?;D(zhuǎn)移酶1抗體包裝5g
細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CTLA-4/CD152 ELISA Kit磷酸化β-肌動(dòng)蛋白抗體包裝250g
硒蛋白M(SELM)檢測(cè)試劑盒英文名稱:SELM ELISA Kit磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體包裝25g
戊糖素(Pentosidine)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Pentosidine ELISA Kit磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體包裝5g
精提酵母tRNA溶液B(Carrier RNA),5mg/mLCD32(FCGR2C) Antibody根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
CD37 Antibody蘇云金芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
CD3EAP Antibody桂花耳*拉丁屬名: Dacryopinax spathularia
CD53 Antibody秦氏蜜環(huán)菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
CD81 Antibody芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus sp.
CD84 Antibody嗜中溫寒冷桿菌拉丁屬名: Frigoribacterium mesophilum
CD98 Antibody解淀粉芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens
CD93 Antibody阿姆斯特丹曲霉拉丁屬名: Eurotium amsodami
CD97 Antibody解角質(zhì)素微桿菌拉丁屬名: Microbacterium keratanolyticum
CD70 Antibody大腸桿菌用途: 獲得來(lái)源于Thermus菌屬的耐高溫酶類用于科學(xué)研究及功能檢測(cè)
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
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