樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
	
	
		
			
				| 
						產(chǎn)品名稱
					 | 
						MAPK絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶ELISA方法
					 | 
			
				| 
						英文名稱
					 | 
						Human mitogen activited protein kinase,MAPK ELISA Kit
					 | 
			
				| 
						貨號(hào)
					 | 
						PH110959
					 | 
		
	
	
		包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
	
	
		
			
				| 
						2400 ng/L
					 | 
						5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
					 | 
						150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
					 | 
			
				| 
						1200ng/L
					 | 
						4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
					 | 
						150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
					 | 
			
				| 
						600ng/L 
					 | 
						3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
					 | 
						150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
					 | 
			
				| 
						300ng/L
					 | 
						2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
					 | 
						150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
					 | 
			
				| 
						150ng/L
					 | 
						1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
					 | 
						150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
					 | 
		
	
	
		組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸;氧化型輔酶Ⅰ半胱天冬酶-3酶原抗體nicotinamide adenine dinucleotide
	
	
		煙酰胺腺嘌呤二核苷酸質(zhì)磷酸酶1抗體nicotinamide adenine dinucleotide
	
	
		尼克酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶維生素D低磷性佝僂病蛋白nicotinamide phosphoribosyltransferase
	
	
		尼克酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶多通道膜蛋白PTCHD2抗體nicotinamide phosphoribosyltransferase
	
	
		促黃體修補(bǔ)相關(guān)蛋白PTCHD3抗體luteotropic hormone
	
	
		17β-雌二醇髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體17β-Estradiol
	
	
		單酰基甘油酯酶磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體MonoacylglycerolLipase
	
	
		單?;视王ッ噶姿峄“逶葱陨L(zhǎng)因子受體αMonoacylglycerolLipase
	
	
		SIGMAR1磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體αSigma non-opioid intracellular receptor 1
	
	
		敏感性脂肪酶磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體αHormone-sensitive lipase
	
	
		脂肪甘油三酯脂酶兒茶酚氧化酶PPO抗體Adipose Triglyceride Lipase
	
	
		卵磷脂膽固醇乙酰轉(zhuǎn)移酶蛋白激酶C抗體Phosphatidylcholine-sterol acyltransferase
	
	
		3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase
	
	
		谷氧還蛋白多聚腺苷酸結(jié)合蛋白抗體glutaredoxin 
	
	
		IgG抗體核纖層蛋白A相關(guān)結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Antibiotics IgG antibody
MAPK絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶ELISA方法Streptococcus pyogenes納豆激酶檢測(cè)試劑盒
	
	
		Sulfitobacter litoralisCXC趨化因子配體2檢測(cè)試劑盒
	
	
		Sulfitobacter marinusI型α干擾素檢測(cè)試劑盒
	
	
		Sulfitobacter pontiacusHC50檢測(cè)試劑盒
	
	
		Syntrophobacter sulfatireducens抑瘤素M檢測(cè)試劑盒
	
	
		Sunxiuqinia elliptica可溶性P選擇素檢測(cè)試劑盒
	
	
		Syntrophomonas cellicola胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3檢測(cè)試劑盒
	
	
		Syntrophomonas curvata呼腸弧病3檢測(cè)試劑盒