樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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大鼠ERp57ELISA試劑盒
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英文名稱
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Rat ERp57 Elisa kit
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貨號
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PR106941
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標準品
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150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標準品
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150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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600ng/L
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3 號標準品
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150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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300ng/L
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2 號標準品
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150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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150ng/L
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1 號標準品
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150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
9-順式環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶酪氨酸磷酸酶受體相互作用蛋白Liprin α1抗體9-cis epoxycarotenoid dioxygenase
9-順式環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶線粒體離子肽酶1抗體9-cis epoxycarotenoid dioxygenase
狂犬病毒抗原微管相關蛋白輕鏈3C抗體Rabies virus
乙型肝炎病毒表面抗原假定腫瘤抑制亮氨酸拉鏈蛋白1抗體hepatitis B virus surface antigen
低分子肝素抗Xa乳酸脫氫酶LDH-C(腫瘤/抗原32)抗體Low Molecular Heparin anti-Xa
低分子肝素抗IIa 腫瘤抑制基因LUCA15抗體Low Molecular Heparin anti-IIa
轉化蛋白RhoA-GTP特異性轉運蛋白1抗體Transforming Protein RhoA - GTP
副流感病毒3抗體RNA聚合酶相關蛋白LEO1抗體Parainfluenzavirus 3 Ab
谷氨酸氧化酶磷酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體L-GLUTAMATEOXIDASE
谷氨酸氧化酶磷酸化特異性蛋白酪氨酸激酶抗體α-Ketoglutaric acid
吲哚丙酸低密度脂蛋白受體相關蛋白5抗體IPA
β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1磷酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白5抗體β-site APP-Cleaving Enzyme 1
生長抑制素磷酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白1抗體somatostation
單不飽和脂肪酸蘇氨酸蛋白激酶LKB1抗體Monounsaturated fatty acid
多不飽和脂肪酸低分子量蛋白7抗體Polyunsaturated fatty acid
大鼠ERp57ELISA試劑盒Bacillus pumilusDNA甲基轉移酶1檢測試劑盒
Bacillus pumilusDNA甲基轉移酶3A檢測試劑盒
Bacillus pumilusDNA甲基轉移酶3B檢測試劑盒
Bacillus pumilusD二聚體檢測試劑盒
Bacillus horikoshiiD-乳酸檢測試劑盒
Lysinibacillus sphaericusD-乳酸脫氫酶檢測試劑盒
Bacillus subtilisE選擇素檢測試劑盒
Rhodococcus rhodochrousFMS樣酪氨酸激酶3配體檢測試劑盒