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產(chǎn)品資料

GPBAR1大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1ELISA方法

GPBAR1大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1ELISA方法
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  • 產(chǎn)品名稱:GPBAR1大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1ELISA方法
  • 產(chǎn)品型號:PR106932
  • 產(chǎn)品展商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
GPBAR1大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1ELISA方法應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途) ,產(chǎn)品規(guī)格: 48T/96T。
產(chǎn)品描述

公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!

產(chǎn)品名稱

GPBAR1大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1ELISA方法

英文名稱

Rat G protein-coupled bile acid receptor 1,GPBAR1 ELISA Kit

貨號

PR106932

包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2400 ng/L

5 號標???品

150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液

1200ng/L

4 號標準品

150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

600ng/L 

3 號標準品

150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

300ng/L

2 號標準品

150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

150ng/L

1 號標準品

150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
有機陰離子轉(zhuǎn)運多肽層粘蛋白α3抗體OATP1B2

細小病毒IgG抗體溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體Parvovirus IgG antibody

瘟熱病毒IgG抗體羧肽酶抑制劑抗體Distemper virus IgG Antibody

淋球菌卵磷酯膽固酰基轉(zhuǎn)移酶抗體N. gonorrhoeae

半乳甘露聚糖脂蛋白脂酶抗體Galactomannan

α半乳甘露聚糖瘦素受體抗體α-GM

雌三醇低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體Estriol

半乳糖缺乏IgA1磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體Gd-IgA1

蛋白磷酸脂酶磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體PP2A

β半乳甘露聚糖富亮氨酸重復(fù)激酶2抗體β-Galactomannan

半乳甘露聚糖肺耐藥相關(guān)蛋白抗體Galactomannan

α半乳甘露聚糖富含亮氨酸重復(fù)家庭蛋白3抗體α-GM

軟骨糖蛋白富含亮氨酸重復(fù)蛋白10抗體Cartilage glycoprotein

隱孢子蟲IgG抗體富含亮氨酸重復(fù)家庭蛋白2抗體Cryptosporidium IgG antbibody

抗血小板IgM抗體富含亮氨酸重復(fù)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體platelet antibodies IgM
GPBAR1大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1ELISA方法Acinetobacter junii擴展蛋白檢測試劑盒

Acinetobacter lwoffii酯酰輔酶A合成酶檢測試劑盒

Alishewanella fetalis吡咯啉-5-羧酸還原酶檢測試劑盒

Alishewanella fetalis萎蔫病檢測試劑盒

Alishewanella fetalis1,25-二羥維生素D(3)24-羥化酶檢測試劑盒

Alishewanella fetalis11β羥基類固脫氫酶檢測試劑盒

Alishewanella fetalis17-羥皮質(zhì)類固檢測試劑盒

Alishewanella fetalis1-磷酸鞘氨檢測試劑盒
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。


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