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產(chǎn)品資料

ATGL大鼠脂肪甘油三酯脂酶ELISA方法

ATGL大鼠脂肪甘油三酯脂酶ELISA方法
  • 如果您對(duì)該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:ATGL大鼠脂肪甘油三酯脂酶ELISA方法
  • 產(chǎn)品型號(hào):PR105954
  • 產(chǎn)品展商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
ATGL大鼠脂肪甘油三酯脂酶ELISA方法應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途) ,產(chǎn)品規(guī)格: 48T/96T。
產(chǎn)品描述

公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!

產(chǎn)品名稱

ATGL大鼠脂肪甘油三酯脂酶ELISA方法

英文名稱

Rat Adipose Triglyceride Lipase,ATGL ELISA Kit

貨號(hào)

PR105954

包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2400 ng/L

5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1200ng/L

4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

600ng/L 

3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

300ng/L

2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150ng/L

1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
SLC39A11  溶質(zhì)載體家族39成員11抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

XTP4  乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

KCTD11  鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

DERP6/C17orf81  表皮源性蛋白6抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

ATG4A  自噬相關(guān)蛋白4A抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

C17orf42  17號(hào)染色體開放閱讀框42抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

C17orf49  17號(hào)染色體開放閱讀框49抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

APG4B/AUTL1  自噬相關(guān)蛋白4B抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

C17orf53  17號(hào)染色體開放閱讀框53抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

phospho-ATG4D(Ser15)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

ATG4D  自噬相關(guān)蛋白4D抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

phospho-ATG4D(Ser341)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

phospho-ATG4A(Ser100)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

C17orf57  17號(hào)染色體開放閱讀框57抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

C17orf64  17號(hào)染色體開放閱讀框64抗體    特價(jià)促銷 0.2ml
ATGL大鼠脂肪甘油三酯脂酶ELISA方法人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白Anti-Phospho FLNA (Ser2152) Antibody人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠促腎上腺皮質(zhì)Anti-Phospho FOXO1 (Ser256) Antibody人VI型膠原α3(COL6α3)elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠骨特異性堿性磷酸酶BAnti-Phospho FOXO4 (Ser197) Antibody人Ⅰ型膠原α1(COL1α1)elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠疊氮胸苷Anti-Phospho G3BP1 (Ser232) Antibody人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)elisa定量檢測(cè)試劑盒

人硫氧化還原蛋白Anti-Phospho GABBR2 (Ser783) Antibody人乳酸脫氫酶C(LDHC)elisa定量檢測(cè)試劑盒

人窖蛋白Anti-Phospho GAB1 (Tyr627) Antibody人CXC趨化因子受體1(CXCR1)elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠多巴Anti-Phospho GAP43 (Ser41) Antibody人補(bǔ)體因子H(CFH)elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體Anti-Phospho GABRG2 (Ser327) Antibody人CXC趨化因子受體3(CXCR3)elisa定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一??時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。



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