樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
|
產(chǎn)品名稱
|
HVD3小鼠25-羥基維生素D3ELISA方法
|
|
英文名稱
|
Mouse 25-Hydroxyvitamin D3(HVD3)ELISA Kit
|
|
貨號
|
PM105880
|
包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬???天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
|
2400 ng/L
|
5 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
1200ng/L
|
4 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
600ng/L
|
3 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
300ng/L
|
2 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
150ng/L
|
1 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
GIMAP7 GTP酶IMAP家族成員7抗體 特價促銷 0.2ml
GIMAP8 GTP酶IMAP家族成員8抗體 特價促銷 0.2ml
GPRIN1 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 特價促銷 0.2ml
GPRIN2 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體 特價促銷 0.2ml
GPRIN3 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白3抗體 特價促銷 0.2ml
DIRC2 干擾腎細胞癌蛋白2抗體 特價促銷 0.2ml
p400 p400蛋白抗體 特價促銷 0.2ml
DNAJC7 DNAJC7蛋白抗體 特價促銷 0.2ml
VAV1 鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 特價促銷 0.2ml
DNMBP 動力結(jié)合蛋白DNMBP抗體 特價促銷 0.2ml
DPH2 白喉酰胺生物合成樣蛋白2抗體 特價促銷 0.2ml
CRMP5 二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體 特價促銷 0.2ml
Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 特價促銷 0.1ml
CRMP4/DRP3 腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體 特價促銷 0.2ml
phospho-VAV1(Tyr160) 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 特價促銷 0.1ml
HVD3小鼠25-羥基維生素D3ELISA方法人CXC趨化因子受體3Anti-NFE2L3 Antibody人磷酯酰肌醇特異性磷脂酶Cβ1(PLCβ1/PI-PLC)elisa定量檢測試劑盒
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子Anti-NFKB1 Antibody人血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)elisa定量檢測試劑盒
大鼠促性腺釋放受體抗體Anti-NFKB p65 Antibody人核因子κB2(NFκB2)elisa定量檢測試劑盒
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子Anti-NFKB2 Antibody人衰老關(guān)鍵蛋白2(FBLN2)elisa定量檢測試劑盒
人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16Anti-NFKBIA Antibody人素β(LTβ)elisa定量檢測試劑盒
人基質(zhì)衍生因子1aAnti-NFKBIE Antibody人功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)elisa定量檢測試劑盒
大鼠主要堿性蛋白Anti-NFKBIL1 Antibody人鱗狀癌抗原1(SCCA1)elisa定量檢測試劑盒
小鼠堿性磷酸酶Anti-NFYB Antibody人孕誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)elisa定量檢測試劑盒