樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
|
產(chǎn)品名稱
|
DLG4小鼠Discs大同源物4ELISA方法
|
|
英文名稱
|
Mouse Discs, Large Homolog 4(DLG4)ELISA Kit
|
|
貨號
|
PM105803
|
包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
|
2400 ng/L
|
5 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
1200ng/L
|
4 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
600ng/L
|
3 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
300ng/L
|
2 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
150ng/L
|
1 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
Granzyme K 顆粒酶K抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
SRGN/Chondroitin sulfate proteoglycan core protein 硫酸軟骨素多糖核心蛋白抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
14-3-3 zeta/delta 14-3-3 protein ζ/δ抗體 特價(jià)促銷 0.1ml
AIFM3 凋亡誘導(dǎo)因子3抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
APIP/Apaf1 Interacting Protein 凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
APPD/LAPF 凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
ANT-1/ATP carrier protein 1/Adenine Nucleotide Translocase 1 腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
CHAC1 陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白1抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
CIDEC 細(xì)胞死亡活化蛋白抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
CLPTM1L/CRR9 順氯氨鉑耐藥相關(guān)蛋白9抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
Calpain 12 鈣激活蛋白酶12抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
Coronin 3 冠蛋白3抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
Aggrecan1 軟骨蛋白聚糖抗體 特價(jià)促銷 0.1ml
phospho-ANAPC1 (Ser355) 磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 特價(jià)促銷 0.1ml
DAD1 細(xì)胞死亡防衛(wèi)蛋白1抗體 特價(jià)促銷 0.2ml
DLG4小鼠Discs大同源物4ELISA方法熒光素PE標(biāo)記豬胰島素蛋白Anti-IKBKB Antibody小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽27(PACAP-27)elisa定量檢測試劑盒
熒光素PE標(biāo)記血藍(lán)蛋白Anti-IKZF2 Antibody小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa定量檢測試劑盒
熒光素PE標(biāo)記人血白蛋白Anti-IKBKG Antibody小鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)elisa定量檢測試劑盒
熒光素PE標(biāo)記胰糜蛋白酶Anti-IKZF3 Antibody小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)elisa定量檢測試劑盒
熒光素APC標(biāo)記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-IL11RA Antibody小鼠轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)elisa定量檢測試劑盒
熒光素APC標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-IL12A Antibody小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)elisa定量檢測試劑盒
熒光素APC標(biāo)記牛IgGAnti-IL13RA1 Antibody小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β4(TGF-β4)elisa定量檢測試劑盒
熒光素APC標(biāo)記牛IgMAnti-IL15RA Antibody小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)elisa定量檢測試劑盒