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產(chǎn)品資料

S100B小鼠S100鈣結(jié)合蛋白BELISA方法

S100B小鼠S100鈣結(jié)合蛋白BELISA方法
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  • 產(chǎn)品名稱:S100B小鼠S100鈣結(jié)合蛋白BELISA方法
  • 產(chǎn)品型號(hào):PM105738
  • 產(chǎn)品展商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡(jiǎn)單介紹
S100B小鼠S100鈣結(jié)合蛋白BELISA方法應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途) ,產(chǎn)品規(guī)格: 48T/96T。
產(chǎn)品描述

公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!

產(chǎn)品名稱

S100B小鼠S100鈣結(jié)合蛋白BELISA方法

英文名稱

Mouse S100 Calcium Binding Protein B(S100B)ELISA Kit

貨號(hào)

PM105738

包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2400 ng/L

5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1200ng/L

4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

600ng/L 

3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

300ng/L

2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150ng/L

1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
5HTR3B/5HT3B receptor  5-羥色胺受體3B抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

CDC37  Hsp90輔助伴侶分子CDC37抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

ADAMTS1  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

ADAMTS4  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

SLC25A20  線粒體二羧酸載體蛋白20抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

P2Y2  嘌呤ATP受體抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

PIH1D1/NOP17  核仁同源蛋白17抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

Vesicle docking protein p115  囊泡對(duì)接蛋白p115抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

ADAMTS7  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體    特價(jià)促銷 0.1ml

BRLF1  EBV立即早期基因BRLF1抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

Cancer/testis antigen 1B/1A  腫瘤/抗原1B/1A    特價(jià)促銷 0.2ml

ADAMTS7(NT)  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體 (N端抗體)    特價(jià)促銷 0.1ml

CTAG1B/Cancer/testis antigen 1  腫瘤/抗原1B    特價(jià)促銷 0.2ml

ADAMTS8  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體    特價(jià)促銷 0.2ml

PRRSV M protein  豬藍(lán)耳病病毒M蛋白抗體    特價(jià)促銷 1ml
S100B小鼠S100鈣結(jié)合蛋白BELISA方法蛋白激酶C(多肽抗原)Anti-ERCC4 Antibody豚鼠水通道蛋白3(AQP-3)elisa定量檢測(cè)試劑盒

腎上腺素能受體β1(抗原)Anti-ERCC1 Antibody豚鼠分泌性白蛋白酶抑制因子(SLPI)elisa定量檢測(cè)試劑盒

膜粘連蛋白-5(抗原)Anti-ERF Antibody大鼠脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)elisa定量檢測(cè)試劑盒

水通道蛋白-4(抗原)Anti-ERGIC3 Antibody大鼠促卵泡(FSH)elisa定量檢測(cè)試劑盒

B7-H4(抗原)Anti-ERI1 Antibody去甲腎上腺素(NA/NE)elisa定量檢測(cè)試劑盒

BADH2抗原Anti-ERI1 Antibody大鼠促黃體**(LH)elisa定量檢測(cè)試劑盒

骨鈣素(抗原)Anti-ERLIN1 Antibody可替?。–otinine)elisa定量檢測(cè)試劑盒

鈣激活通道蛋白Anti-ES8L1 Antibody豚鼠不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。


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