樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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SESN2小鼠Sestrin小鼠2蛋白ELISA方法
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英文名稱
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Mouse Sestrin 2(SESN2)ELISA Kit
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貨號
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PM105736
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標準品
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150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標準品
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150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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600ng/L
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3 號標準品
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150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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300ng/L
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2 號標準品
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150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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150ng/L
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1 號標準品
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150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ACD 腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體 特價促銷 0.2ml
ACHE/Acetylcholinesterase 乙酰膽堿酶抗體 特價促銷 0.1ml
Acinus Acinus抗體 特價促銷 0.2ml
phospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體 特價促銷 0.1ml
Ack1 醋酸激酶1抗體 特價促銷 0.2ml
Phospho-Ack1(Tyr859/860) 磷酸化Ack1抗體 特價促銷 0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr284) 磷酸化Ack1抗體 特價促銷 0.1ml
Phospho-Ack1(Tyr326) 磷酸化Ack1抗體 特價促銷 0.1ml
ACSL1 長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體 特價促銷 0.2ml
ACTH (1-39) 促腎上腺皮質(zhì)**(1-39)抗體 特價促銷 0.1ml
Phospho-MKP1 (Ser318) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體 特價促銷 0.1ml
ACTH (18-39) 促腎上腺皮質(zhì)**ACTH(18-39)抗體 特價促銷 0.1ml
ACTH (7-23) 促腎上腺皮質(zhì)**ACTH (7-23)抗體 特價促銷 0.1ml
Actin α/alpha-SMA 肌動蛋白α(α-SMA)抗體 特價促銷 0.1ml
Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體 特價促銷 0.1ml
SESN2小鼠Sestrin小鼠2蛋白ELISA方法血管內(nèi)皮生長因子(多肽抗原)Anti-EPHB2 Antibody大鼠白介素4(IL-4)elisa定量檢測試劑盒
血管內(nèi)皮生長因子A抗原Anti-EPHB6 Antibody大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)elisa定量檢測試劑盒
血管內(nèi)皮生長因子C型抗原Anti-EPHX3 Antibody大鼠肝生長因子(HGF)elisa定量檢測試劑盒
血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-EPN1 Antibody黃素單核苷酸(FMN)elisa定量檢測試劑盒
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-EPHX4 Antibody豚鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)elisa定量檢測試劑盒
血管內(nèi)皮生長因子受體-3(多肽)Anti-EPN2 Antibody豚鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa定量檢測試劑盒
血管內(nèi)皮生長因子受體-3抗原Anti-EPN3 Antibody前列環(huán)素(PGI2)elisa定量檢測試劑盒
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原Anti-EPS8L2 Antibody豚鼠苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)elisa定量檢測試劑盒