樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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IL12B小鼠白介素12BELISA檢測(cè)試劑盒
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英文名稱
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Mouse Interleukin 12B(IL12B)ELISA Kit
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貨號(hào)
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PM105664
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,???浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
橋粒芯膠粘蛋白3(DSC3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)膠紅酵母Sheep MT1M (Metallothionein 1M) ELISA Kit
表皮膜蛋白3(EMP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)運(yùn)動(dòng)節(jié)桿Sheep FGF21(Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit
半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)擬莖點(diǎn)霉Sheep CLS (Cardiolipin Synthase) ELISA Kit
腫瘤壞死因子受體超家族成員10A(TNFRSF10A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)BrevibacillusSheep HTRA1 (HtrA Serine, Peptidase 1) ELISA Kit
血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)沃氏葡萄球Sheep ANGPT4 (Angiopoietin 4) ELISA Kit
磷酸二酯酶12(PDE12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)杏鮑菇Sheep ADIPOR1 (Adiponectin Receptor 1) ELISA Kit
S100鈣結(jié)合蛋白A14(S100A14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)Lysobacter soli Sheep FOXO4 (Forkhead Box Protein O4) ELISA Kit
胃蛋白酶原A(PGA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)焦曲霉Sheep CNTNAP1 (Contactin Associated Protein 1) ELISA Kit
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)嗜根考克氏Sheep CKMT1A (Creatine Kinase, Mitochondrial 1A ) ELISA Kit
嗜酸性粒過(guò)氧化物酶(EPX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)芽孢桿屬Sheep MAF (Macrophage Activating Factor) ELISA Kit
蛋白聚糖4(PRG4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)枯草芽孢桿Sheep DNM2 (Dynamin 2) ELISA Kit
X-連鎖凋亡蛋白抑制因子(XIAP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)巨型艾美耳球蟲Sheep CVL/EZR (Cytovillin/Ezrin) ELISA Kit
血小板衍生生長(zhǎng)因子C(PDGFC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)粟粒皮禿馬勃Sheep C5 (Complement Component 5) ELISA Kit
泛素特異性肽酶8(USP8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)肉色鏈孢囊Sheep Tn-T (Troponin T) ELISA Kit
醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)紫色紅曲霉Sheep AGR2 (Anterior Gradient Protein 2) ELISA Kit
IL12B小鼠白介素12BELISA檢測(cè)試劑盒環(huán)核苷酸陽(yáng)離子通道蛋白α2抗原Anti-CDK5 Antibody猴二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙酰酶(DLAT)elisa定量檢測(cè)試劑盒
C型鈉尿肽抗原Anti-CDK5RAP3 Antibody豬染色質(zhì)區(qū)解旋酶DNA結(jié)合蛋白3(CHD3)elisa定量檢測(cè)試劑盒
睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗原Anti-CDK6 Antibody猴骨保護(hù)素配體(OPGL)elisa定量檢測(cè)試劑盒
凝血因子5抗體Anti-CDK8 Antibody豬成纖維生長(zhǎng)因子受體2(FGFR2)elisa定量檢測(cè)試劑盒
抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)Anti-CDK9 Antibody豬補(bǔ)體成分5(C5)elisa定量檢測(cè)試劑盒
Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原)Anti-CDKL1 Antibody猴前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合酶1(PTGS1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
IV型膠原(Collagen Ⅳ Ⅳ 型膠原)Anti-CDKL2 Antibody豬血小板相關(guān)球蛋白(PAIg)elisa定量檢測(cè)試劑盒
I型膠原蛋白Anti-CDKL4 Antibody猴前白蛋白(PA)elisa定量檢測(cè)試劑盒