樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
|
產(chǎn)品名稱
|
17-OHCS人尿17羥皮質(zhì)類固醇ELISA方法
|
|
英文名稱
|
Human 17-Hydroxycorticosteroids,17一OHCS ELISA Kit
|
|
貨號
|
PH097298
|
包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
|
2400 ng/L
|
5 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
1200ng/L
|
4 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
600ng/L
|
3 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
300ng/L
|
2 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
150ng/L
|
1 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
綿羊觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 鞘氨盒屬M(fèi)ouse TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit
綿羊胱天蛋白酶11(CASP11)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 泡盛曲霉Mouse ADIPOR1 (Adiponectin Receptor 1) ELISA Kit
綿羊色素P450家族成員7A1(CYP7A1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 燼灰藍(lán)鏈霉Mouse TNFRSF1B (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B) ELISA Kit
綿羊CXC趨化因子受體3(CXCR3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 孢小克銀漢霉南變種Mouse RANκL (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B Ligand) ELISA Kit
綿羊低密度脂蛋白受體(VLDLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒禾谷絲核Mouse TREM-1 (Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1) ELISA Kit
綿羊泛素分解酶(DUB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 光滑假絲酵母Mouse TSLP (Thymic Stromal Lymphopoietin) ELISA Kit
綿羊端錨聚合酶1 (TNKS1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒正青霉Mouse sVCAM-1 (soluble vasccular cell adhesion molecule 1) ELISA Kit
綿羊球蛋白A2 (IgA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒嗜冷成對桿Mouse FLT1/VEGFR1 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit
綿羊蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿Mouse VEGFR-2/KDR (Vascuoar Endothelial Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit
綿羊衰變加速因子(DAF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 瑞士乳桿Mouse HO-1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit
綿羊ras同源物基因家族成員a(RHOA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒相思根瘤Mouse HO-2 (Heme Oxygenase 2, Decycling) ELISA Kit
綿羊胰腺特異性轉(zhuǎn)錄因子1α (PTF1α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒豇豆慢生根瘤Mouse RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B) ELISA Kit
綿羊間隙連接蛋白(Cx)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 土生類諾卡氏Mouse HJV (Hemojuvelin) ELISA Kit
綿羊銅藍(lán)蛋白(CP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒香菇Mouse HPA (Heparanase) ELISA Kit
綿羊生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/NAP3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 綠色鏈霉Mouse ALB (Albumin) ELISA Kit
17-OHCS人尿17羥皮質(zhì)類固醇ELISA方法磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體Human OLFM3 ELISA Kit己二酸
NADH復(fù)合體6抗體Human OLIG2(Oligodendrocyte transcription factor 2) ELISA Kit結(jié)晶硫酸鈉
黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體Human OMA1 ELISA Kit硫酸氫鈉
同源盒基因Msx2抗體Human ODF2L ELISA Kit偏硼酸鈉
磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體Human OMCG1 ELISA Kit錫酸鈉
膜型基質(zhì)金屬蛋白酶胞質(zhì)尾結(jié)合蛋白1抗體Human OCTN2 ELISA Kit槐角苷
周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體Human OCRL ELISA Kit芒柄花素
自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體Human DNAJB1(DnaJ homolog subfamily B member 1) ELISA Kit(-)-薄荷酮