公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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UFC人尿游離皮質(zhì)醇ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human urinary free cortisol,UFC ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH097284
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)??品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
雞軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒皺膜假絲酵母Mouse CTLA4 (Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4) ELISA Kit
雞骨涎蛋白(BSP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 泰安羧酸利用桿Mouse D2D (D-Dimer) ELISA Kit
雞胰島素原(PI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒長雙歧桿Mouse DAP6 (Death Associated Protein 6) ELISA Kit
雞軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 玫瑰色熱微Mouse DCN (Decorin) ELISA Kit
雞鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2B(GUCA2B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 球毛殼Mouse DEFa5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit
雞甘露糖受體(MR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Roseivivax isoporaeMouse DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit
雞胎盤蛋白(PP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 蠟蚧Mouse DHEA-S (Dehydroepiandrosterone sulfate) ELISA Kit
雞D-乳酸脫氫酶(D-LDH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 乳酸乳球乳亞種Mouse DHEA (Dehydroepiandrosterone) ELISA Kit
雞胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP-7)酶聯(lián)吸附測定試劑盒貝倫格葡萄座腔Mouse DPD (Deoxypyridinoline) ELISA Kit
雞苯酸諾龍/苯酸去甲睪酮(NP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒三葉草根瘤Mouse DNASE1 (Deoxyribonuclease I) ELISA Kit
雞嗅素4(OLFM4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿Mouse VAP-1 (Vascular Adhesion Protein 1) ELISA Kit
雞補(bǔ)體成分5a(C5a)酶聯(lián)吸附測定試劑盒破傷風(fēng)梭Mouse Des (Desmin) ELISA Kit
雞血紅蛋白(HB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒纖細(xì)芽孢桿Mouse DAO (Diamine Oxidase) ELISA Kit
雞雌受體α(ERα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 桃色歐文氏Mouse H3 (Histone H3) ELISA Kit
雞NOD樣受體(NLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸埃希Mouse DKK2 (Dickkopf Related Protein 2) ELISA Kit
UFC人尿游離皮質(zhì)醇ELISA檢測試劑盒RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體Human PARVB ELISA Kit磷酸咯萘啶
性脈絡(luò)叢腦膜炎病蛋白抗體Human PARVG ELISA KitL-正亮氨酸
自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B抗體Human PAWR(PRKC apoptosis WT1 regulator protein) ELISA KitD-環(huán)絲氨酸
黃體釋放/促性腺釋放抗體Human PARVB ELISA KitBOC-甘氨酸
LRRC23蛋白抗體Human PASK ELISA KitN-乙酰-L-蛋氨酸
LRRC39蛋白抗體Human PASK ELISA Kitα-半乳糖苷酶
自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Human PARVG ELISA Kit風(fēng)味酶
L3MBTL3蛋白抗體Human PAQR4 ELISA Kit羧肽酶Y(酵母)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。