樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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Thrombin人凝血酶ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human Thrombin ELISA Kit
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貨號
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PH097279
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標準品
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150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標準品
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150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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600ng/L
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3 號標準品
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150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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300ng/L
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2 號標準品
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150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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150ng/L
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1 號標準品
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150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
雞抗神經(jīng)節(jié)苷脂M1抗體(Anti-GM1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 茯苓*Mouse C1qR1 (Complement Component 1Q Receptor1) ELISA Kit
雞金屬硫蛋白1M (MT1M)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿Mouse C5 (Complement Component 5) ELISA Kit
雞內(nèi)皮抑制素(ES)酶聯(lián)吸附測定試劑盒螺卷毛殼Mouse CFB (Complement Factor B) ELISA Kit
雞纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒奇異球Mouse CFD (Complement Factor D) ELISA Kit
雞破骨分化因子(ODF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 大豆慢生根瘤Mouse CFH (Complement Factor H) ELISA Kit
雞血紅素氧化酶1(HO1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母Mouse C3a (Complement Component 3a) ELISA Kit
雞乳酸脫氫酶B(LDHB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 地衣芽孢桿Mouse C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit
雞血幼素(HJV/HFE2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 血紅鞘氨單胞Mouse C5a (Complement Component 5a) ELISA Kit
雞胰島素樣生長因子1受體(IGF1R)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸埃希Mouse CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit
雞微粒體谷胱甘肽S轉移酶1(MGST1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒德爾布有孢酵母Mouse CX26 (Connexin 26) ELISA Kit
雞腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 竹喙球Mouse CX31 (Connexin 31) ELISA Kit
雞回腸脂肪酸結合蛋白6(FABP6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒敏捷食酸Mouse CX37 (Connexin 37) ELISA Kit
雞復制蛋白A(RPA-70)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 動性球Mouse CX40 (Connexin 40) ELISA Kit
雞促甲狀腺素釋放(TRH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒假單胞Mouse CX43 (Connexin 43) ELISA Kit
雞心肌營養(yǎng)素合成酶/心磷脂合酶(CLS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 淺黃鏈霉Mouse CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit
Thrombin人凝血酶ELISA檢測試劑盒富含亮氨酸重復家庭蛋白3抗體Human PCSK2 ELISA Kit烏賊墨
富含亮氨酸重復蛋白10抗體Human PDAP1 ELISA Kit氨丁三醇
富含亮氨酸重復家庭蛋白2抗體Human PCM1 ELISA KitDL-苯丙氨酸
富含亮氨酸重復死亡結構域蛋白抗體Human PDCD10 ELISA KitL-賴氨酸甲酯鹽酸鹽
層粘連蛋白受體1抗體(C端)Human PCNP ELISA KitL-脯氨酸芐酯鹽酸鹽
層粘連蛋白受體1抗體(N端)Human PDCD2(Programmed cell death protein 2) ELISA KitDL-絲氨酸
磷酸化增強因子-1抗體Human PCNXL2 ELISA KitL-甘-酪二肽
層粘連相關多肽蛋白1抗體Human PCOLCE2 ELISA KitD-纈氨酸甲酯鹽酸鹽