樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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DPT人皮膚蛋白ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH097251
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
雞蛋白激酶抑制劑α(PKIα )酶聯(lián)吸附測定試劑盒梭形凸臍蠕孢Human RELB (V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog B) ELISA Kit
雞補(bǔ)體成分3(C3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 炭黑曲霉Human IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit
雞上皮粘附分子(Ep-CAM/CD326)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 粉肉擬層孔Human AIM2 (Absent In Melanoma 2) ELISA Kit
雞促血管**素1(ANG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大洋枝芽孢桿Human TSPAN30/CD63 (Tetraspanin 30) ELISA Kit
雞凝血因子Ⅹ(F10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 枯草芽孢桿Human BANP (BTG3 Associated Nuclear Protein) ELISA Kit
雞組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒尖孢鐮孢Human PRKG1 (Protein Kinase, cGMP Dependent Type I) ELISA Kit
雞堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 茶輪斑盤多毛孢Human PDE4D (Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit
雞血管**素樣蛋白1(ANGPTL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 微球Human CKB (Creatine Kinase, Brain) ELISA Kit
雞多巴脫羧酶(DDC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 柞蠶鏈球Human Anti-LKM-1 IgG(Anti-Liver-Kidney Microsomes-1 IgG) ELISA Kit
雞甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母Human LOXL4 (Lysyl Oxidase Like Protein 4 ) ELISA Kit
雞心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 泡囊短波單胞Human TNFRSF1B (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B) ELISA Kit
雞補(bǔ)體因子4 (C4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Enterobacter cloacae subsp. dissolvensHuman ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit
雞低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Human LL-37 (Antibacterial Protein LL-37) ELISA Kit
雞谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 哈茨木霉Human Tα1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
雞游離甲狀腺素(fT4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 灰黃青霉Human PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit
DPT人皮膚蛋白ELISA檢測試劑盒離子通道蛋白家族成員3抗體Human PMFBP1 ELISA KitTaq plus酶
角蛋白82抗體Human KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) ELISA KitT3 RNA聚合酶
20號(hào)染色體開放閱讀框19抗體Human PNMA2 ELISA Kit對-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷
角膜蛋白多糖抗體Human PMFBP1 ELISA Kit縮節(jié)
含賴氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體Human KRT6A(KeRatin, type II cytoskeletal 6A) ELISA Kit聚乙二醇10000
激肽釋放酶3/舒血管素3抗體Human PMF1 ELISA Kit3-甲氧基酚
上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體Human PLS1 ELISA Kit萘酚AS-MX磷酸鹽
腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體Human PLP2(Proteolipid protein 2) ELISA Kit對二氯苯