公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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Cortisol人皮質(zhì)醇ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human Cortisol ELISA Kit
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貨號
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PH097249
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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2400 ng/L
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5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
雞信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒嗜中溫寒冷桿Human GAD1 (Glutamate Decarboxylase 1) ELISA Kit
雞食欲素/阿立新A(OXA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒解脂亞羅酵母Human PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit
雞核孔蛋白133kda(NUP133)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Mucor ardhlaengiktusHuman PPAR-δ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta) ELISA Kit
雞堿性磷酸酶(ALP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 寬被多年臥孔Human NUP62 (Nucleoporin 62kDa) ELISA Kit
雞催乳素(PRL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒白鬼筆Human PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit
雞膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2 )酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母Human RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B) ELISA Kit
雞腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒葡萄牙棒孢酵母Human NUMA1 (Nuclear Mitotic Apparatus Protein 1) ELISA Kit
雞硫酸軟骨素(CS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 需鈉弧Human IL-33 (Interleukin 33) ELISA Kit
雞谷氧還蛋白3(GLRX3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒斑玉蕈Human MCAM (Melanoma Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit
雞TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 根瘤Human MIA1 (Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) ELISA Kit
雞磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒假單胞屬Human MFI2 (Melanotransferrin) ELISA Kit
雞閉鎖蛋白/遮光蛋白(OCLN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒巨大芽胞桿Human SPTβN4 (Spectrin Beta, Non Erythrocytic 4) ELISA Kit
雞轉(zhuǎn)錄激活因子-4(ATF-4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 嗜松青霉Human IκBα (Inhibitory Subunit of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit
雞肌營養(yǎng)**蛋白(DMD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母Human IκBβ (Inhibitory Subunit of NF Kappa B Beta) ELISA Kit
雞唾液酸結(jié)合球蛋白樣凝集素2(SIGLEC2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉Human HNRPA2B1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1) ELISA Kit
Cortisol人皮質(zhì)醇ELISA檢測試劑盒Kelch樣蛋白22抗體Human POFUT2 ELISA Kit對基-α-D-吡喃半乳糖苷
電壓門控通道Kv4.1抗體Human POFUT1 ELISA Kit對-N-乙酰-α-D-氨基葡萄糖苷
酸敏感離子通道蛋白3抗體Human POF1B ELISA Kit神經(jīng)氨酸酶(梭)
Klotho多肽蛋白抗體Human POLD2 ELISA Kit人血纖維蛋白原
鈣激活通道蛋白4抗體Human POGK ELISA Kit二十二烷酸
Kelch樣蛋白23抗體Human POLD1 ELISA Kit2-苯丙醇
BTB-kelch蛋白家族10抗體Human PNMAL1 ELISA Kit環(huán)己醇
BTB-kelch蛋白家族4抗體Human PNCK ELISA Kit苦參堿
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl???物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。