樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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PGRN人前顆粒蛋白ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human progranulin,PGRN ELISA Kit
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貨號
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PH097215
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
雞煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 淺灰白鏈霉Human EP3 (Prostaglandin E Receptor 3) ELISA Kit
雞性T相關(guān)抗原4(CTLA4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 食品**快速檢測箱 上等配置Human PGF (Prostaglandin F) ELISA Kit
雞絨毛蛋白(CVL/EZR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 耐輻射奇球Human PGF2α (Prostaglandin F2α) ELISA Kit
雞胰腺再生蛋白3α(REG3α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒運(yùn)動發(fā)酵單胞運(yùn)動亞種Human FP (Prostaglandin F Receptor) ELISA Kit
雞誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(NOS2/iNOS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒小鏈孢Human PTGIS (Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit
雞生長分化因子9(GDF9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒短小芽孢桿Human PTGES2 (Prostaglandin E Synthase 2) ELISA Kit
雞生長相關(guān)蛋白43(GAP43)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 大腸埃希Human PTGS1 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1) ELISA Kit
雞谷氨酸脫羧酶(GAD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 球毛殼Human PTGS2/COX-2 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2) ELISA Kit
雞基質(zhì)衍生因子1(SDF-1/CXCL12)酶聯(lián)吸附測定試劑盒草木樨中華根瘤Human ACP3/PAP (Prostatic Acid Phosphatase 3) ELISA Kit
雞β-骨膠原交聯(lián)(β-CTx)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蘇云金芽孢桿Human NT-ProANP (N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
雞長效甲狀腺(LATS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 大腸埃希Human Dyn (Big Dynorphin) ELISA Kit
雞B-趨化因子(BLC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 桔橙鏈霉Human DSP (Desmoplakin) ELISA Kit
雞Apelin 13(AP13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 土曲霉Human DSG-E1 (Desmogleins 1) ELISA Kit
雞纖溶酶原激活劑(PLGA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 假單胞Human SM/SPH (Sphingomyelin) ELISA Kit
雞去唾液酸糖蛋白受體1(ASGR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒假單胞Human ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1) ELISA Kit
PGRN人前顆粒蛋白ELISA檢測試劑盒吲哚乙酸/植物生長素單克隆抗體Human PYCR2 ELISA Kit三異辛
白介素4受體抗體IL-4RαHuman PTGES3(Prostaglandin E synthase 3) ELISA Kit偏釩酸銀
白介素2受體γ鏈抗體Human QKI ELISA Kit牻牛兒酮
白介素1受體1抗體Human QPRT(Quinolinate phosphoribosyltransferase) ELISA Kit3,5-O二咖啡酰基奎寧酸
白介素1受體2抗體Human PURA ELISA Kit3,6-二芥子?;崽?/span>
白介素20受體α鏈抗體Human PUS1 ELISA Kit三百草酮
白介素20受體β鏈抗體Human PVRIG ELISA Kit對羥基苯乙酮
吲哚乙酸抗體/植物生長素抗體Human PUS3 ELISA Kit防風(fēng)
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