公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
|
產(chǎn)品名稱
|
PGE2人前列腺素E2ELISA檢測試劑盒
|
|
英文名稱
|
Human Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit
|
|
貨號
|
PH097210
|
包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
|
2400 ng/L
|
5 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
1200ng/L
|
4 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
600ng/L
|
3 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
300ng/L
|
2 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
150ng/L
|
1 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
雞血漿抗凝蛋白C(PC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 大腸埃希氏桿Human Fcγ (Fc Fragment of IgG) ELISA Kit
雞甲狀腺激球蛋白(TSI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒PseudosalinisphaeraHuman IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit
雞核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒竹喙球Human IgG2 (Immunoglobulin G2) ELISA Kit
雞Corin蛋白(CRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒腐皮鐮孢Human IgG3 (Immunoglobulin G3) ELISA Kit
雞基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 小單孢Human IgG4 (Immunoglobulin G4) ELISA Kit
雞肝配蛋白A3 (EFNA3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒茄類鐮刀Human MCP/CD46 (Membrane Cofactor Protein) ELISA Kit
雞B連接蛋白(BLNK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 塊鱗灰青鵝膏Human TSP-4 (Thrombospondin-4) ELISA Kit
雞蛋白C抑制劑(PCI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒禾谷絲核Human Ponticulin ELISA Kit
雞神經(jīng)肽Y(NPY)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉Human TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit
雞磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 白僵Human TDT (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase) ELISA Kit
雞泛素蛋白D(UBD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒樺剝管孔Human SMN1 (Survival of Motor Neuron 1, Telomeric) ELISA Kit
雞基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒海馬齒平臍蠕孢Human EM2 (Endomorphin 2) ELISA Kit
雞半乳凝集素4(GAL4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒異常威克漢姆酵母Human ETRA (Endothelin Receptor A) ELISA Kit
雞磷脂酶A2受體1(PLA2R1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒類阿達(dá)青霉Human ECE1 (Endothelin Converting Enzyme 1) ELISA Kit
雞生長調(diào)節(jié)致癌基因β(GROβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 粘質(zhì)沙雷氏Human REPIN1 (Replication Initiator 1) ELISA Kit
PGE2人前列腺素E2ELISA檢測試劑盒磷酸化整合素β3抗體Human RABGGTA ELISA Kit三異戊
球蛋白A誘導(dǎo)同源蛋白抗體Human Rad51D ELISA Kit焦性沒食子酸
白介素2抗體Human RABL2A ELISA Kit鹽酸胍
白介素2抗體Human RABL2B ELISA Kit4-乙酮
DNA結(jié)合抑制因子4抗體Human RABL3 ELISA Kit三氟乙酰丙酮
胰島素樣生長因子2受體抗體Human RAC2 ELISA Kit肉桂醇
鋅指蛋白Aiolos抗體Human RAD1 ELISA Kit鎵
胰島抗原12/核轉(zhuǎn)錄因子SOX13抗體Human RACK1 ELISA Kit莪術(shù)油
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。