樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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HLNL人羥基賴正己氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒
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英文名稱
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Human hydroxylysinonorleucine,HLNL ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH097197
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到???。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
雞核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒木賊鐮孢Human SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit
雞球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 枯草芽孢桿Human MSP (Macrophage Stimulating Protein) ELISA Kit
雞MAX二聚化蛋白1(mxd1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒基利恩帚枝霉Human MAF (Macrophage Activating Factor) ELISA Kit
雞泛素關(guān)聯(lián)蛋白2 (UBAP2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒谷氨酸棒桿Ⅲ型Human MCSFR (Macrophage Colony Stimulating Factor Receptor) ELISA Kit
雞酮酸脫氫酶α(PDHα)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母Human MCF (Macrophage Chemotatic Factor) ELISA Kit
雞FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Passalora fulvaHuman MIP-3β/ELC/CCL19 (Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit
雞生長分化因子6(GDF6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大豆慢生根瘤Human MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit
雞甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 糙皮側(cè)耳Human MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit
雞果糖二磷酸縮酶A(ALDOA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蛹蟲草Human FZD8 (Frizzled Homolog 8) ELISA Kit
雞血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒蠟樣芽孢桿Human PDCD1 (Programmed Cell Death Protein 1) ELISA Kit
雞抗磷脂抗體(APA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 檸條根瘤Human AP (Allopregnanolone) ELISA Kit
雞性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒玉米大斑凸臍蠕孢Human CRHBP (Corticotropin Releasing Hormone Bingding Protein) ELISA Kit
雞抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 圍小叢殼Human αHSP (Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit
雞通用轉(zhuǎn)錄因子II B(GTF2B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒假單胞Human MMP-28 (Matrix Metalloproteinase 28) ELISA Kit
雞胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 干酪乳桿Human TLR4 (Toll-Like Receptor 4) ELISA Kit
HLNL人羥基賴正己氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒白介素14抗體Human REX1 ELISA Kit酸棗仁皂苷 B
腫瘤凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體Human RERG ELISA Kit生姜油
Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體Human REXO4 ELISA Kit葒草苷
胰島素受體α抗體Human RFC2 ELISA Kit23-乙酰澤瀉醇B
整合素α3β1抗體Human REXO2 ELISA Kit黃柏酮
整合素β7抗體Human RCBTB2 ELISA Kit薄芝絲體粉
支架蛋白抗體Human Recoverin ELISA Kit吲達(dá)帕
非洲爪蟾IGC抗體Human RCC1 ELISA Kit鹽酸洛特羅