樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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HSP27人熱休克蛋白27ELISA檢測(cè)試劑盒
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英文名稱(chēng)
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Human HeatShockProteins27,HSP27 ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH097149
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
雞GDP解離抑制因子1(GDI1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒油白蘑Human D2D (D-Dimer) ELISA Kit
雞封閉蛋白1(CLDN1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 黃色單胞Human D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit
雞錨蛋白B(Ank-B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 寡氧單胞Human F8 (Coagulation Factor Ⅷ) ELISA Kit
雞胰腺癌標(biāo)志物(CA242)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒蘇云金芽孢桿Human PA2G4 (Proliferation Associated Protein 2G4) ELISA Kit
雞α干擾素(IFN-α) 酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒針葉散斑殼Human COL1α1 (Collagen Type I Alpha 1) ELISA Kit
雞角蛋白13(CK-13/KRT13)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 玉米黑粉Human COL6α3 (Collagen Type VI Alpha 3) ELISA Kit
雞前動(dòng)力蛋白受體2(PKR2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒甘家湖擬諾卡氏Human COL13 (Collagen Type XIII) ELISA Kit
雞黏著斑激酶(FAK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 變灰青霉Human COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit
雞β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Enhydrobacter aerosaccus Staley et al. Human CTX-III (Cross Linked C-telopeptide of Type III Collagen) ELISA Kit
雞粒集落激因子受體(GCSFR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒芽胞桿屬Human EJ/GlyRS (Anti-EJ-Antibody) ELISA Kit
雞高分子量角蛋白(CK-HMW)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿Human EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit
雞接頭蛋白2(ELMO2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒蠟狀芽孢桿Human SELE (E-Selectin) ELISA Kit
雞組織因子途徑抑制因子(TFPI)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒糞腸球Human F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit
雞血漿谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 潮汐玫瑰變色Human Flt3 (FMS Like Tyrosine Kinase 3) ELISA Kit
雞色素上皮衍生因子(PEDF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒副球?qū)貶uman GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit
HSP27人熱休克蛋白27ELISA檢測(cè)試劑盒二甲基化組蛋白H3K4抗體Human SCN4B ELISA Kit益母草LAMP鑒定試劑盒
二甲基化組蛋白H3K9抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)Elisa測(cè)定試劑盒
基化組蛋白H3抗體Human SEC23IP ELISA Kit鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)蛋白激酶2b抗體流式組化
乙?;M蛋白H3抗體Human VTCN1(V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1) ELISA Kit結(jié)蛋白(抗體流式組化)IHC WB
乙酰化組蛋白H3抗體Human SEC24C ELISA Kit成纖維生長(zhǎng)因子-10/纖維母生長(zhǎng)因子-10抗體流式組化
磷酸化肝核因子4α抗體Human SEC24A ELISA Kit整合素-β3抗體流式組化
高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Human SEC31A ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體流式組化
磷酸化組蛋白H3抗體Human SDR39U1 ELISA Kit配對(duì)盒基因8抗體流式組化