樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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HSP-22人熱休克蛋白22ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human Heat Shock Protein 22(HSP-22)ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH097150
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
雞胰腺再生蛋白1α(REG1α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒小角狀節(jié)皮Human GATA2 (GATA Binding Protein 2) ELISA Kit
雞胎盤蛋白13 (PP13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒金黃桿屬Human GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit
雞內(nèi)皮蛋白C受體(EPCR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒空腸彎曲桿Human GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit
雞普列克底物蛋白同源物樣結(jié)構(gòu)域家族A成員2(PHLDA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒斯氏油脂酵母Human GATA5 (GATA Binding Protein 5) ELISA Kit
雞表皮活化肽因子(CAPF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 分枝節(jié)桿Human GDI1 (GDP Dissociation Inhibitor 1) ELISA Kit
雞突觸核蛋白γ(SNCγ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 pGAPZBHuman GAP (GTPase Activating Protein) ELISA Kit
雞泛素蛋白(Ub)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 焦曲霉Human GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit
雞過氧化物酶體膜蛋白3(PMP3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒潘泰萊里亞島鹽單胞Human RGS4 (Regulator of G Protein Signaling 4) ELISA Kit
雞癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒膠孢Human HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit
雞基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒寡養(yǎng)單胞Human H-Cadherin (Cadherin, Heart) ELISA Kit
雞Rap鳥嘌呤交換因子1(RAPGEF1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒其他質(zhì)粒Human NRG-4 (Neuregulin 4) ELISA Kit
雞骺蛋白聚糖(EPYC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 橄欖產(chǎn)色鏈霉Human FcaR (Fc Fragment of IgA Receptor) ELISA Kit
雞過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蠟樣芽孢桿Human PTPRK (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type K) ELISA Kit
雞甲狀腺素受體α(THRα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 梭狀芽孢桿Human SELL (L-Selectin) ELISA Kit
雞輔肌動(dòng)蛋白α3(ACTN3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒釀酒酵母Human MXD1 (MAX Dimerization Protein 1) ELISA Kit
HSP-22人熱休克蛋白22ELISA檢測試劑盒組織相容性復(fù)合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit相關(guān)抗體流式組化 XR0280R(抗大鼠)
肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kitsrc原癌基因抗體流式組化
HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA KitL-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽
瘤病調(diào)控因子1抗體(鋅指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA KitBOC-L-天冬氨酸
人類狀瘤病18 E6單克隆抗體Human SCN4B ELISA Kit胰凝乳蛋白酶(牛)
異質(zhì)核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit卵白素(雞蛋)
異質(zhì)核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit透明質(zhì)酸鈉
異質(zhì)核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit青霉素鈉