公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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Hc人溶血補(bǔ)體ELISA檢測(cè)試劑盒
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英文名稱(chēng)
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Human Hemolytic complement,Hc ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH097134
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
豚鼠11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 史氏芽孢桿Human MUC1 (Mucin 1) ELISA Kit
豚鼠粘蛋白5B(MUC5B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒Erwinia persicina Human CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit
豚鼠滑行蛋白α(TXLNa)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒頭狀莖點(diǎn)霉Human CaN (Calcineurin) ELISA Kit
豚鼠甘露糖受體(MR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 金針菇Human CGRP (Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit
豚鼠封閉蛋白3(CLDN3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 頂黑毛殼Human CTR (Calcitonin Receptor) ELISA Kit
豚鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒出芽短梗霉(黑酵母)Human CaSR (Calcium Sensing Receptor) ELISA Kit
豚鼠5核苷酸酶(5-NT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 大豆慢生根瘤Human CACYBP (Calcyclin Binding Protein) ELISA Kit
豚鼠白調(diào)節(jié)素(LR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 釀酒酵母Human CALD (Caldesmon) ELISA Kit
豚鼠S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒檸檬兩面神Human MSR1 (Macrophage Scavenger Receptor 1) ELISA Kit
豚鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 米根霉Human CAM (Calmodulin) ELISA Kit
豚鼠髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽孢桿Human CNX (Calnexin) ELISA Kit
豚鼠血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 健康皮張抗原(兔皮A)Human CRT (Calreticulin) ELISA Kit
豚鼠上皮膜抗原(EMA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 約翰遜鎖擲酵母Human CR (Calretinin) ELISA Kit
豚鼠內(nèi)皮蛋白C受體(EPCR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母Human CALU (Calumenin) ELISA Kit
豚鼠長(zhǎng)效甲狀腺(LATS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 陰溝腸桿Human CAM-Ab (Anti-Calmodulin Specific Antibody) ELISA Kit
Hc人溶血補(bǔ)體ELISA檢測(cè)試劑盒型肝炎病NS5B抗體Human SHROOM1 ELISA Kit鄰-β-D-吡喃半乳糖苷
缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體Human SH3GL3 ELISA Kit異檸檬酸脫氫酶
HEG同源蛋白1抗體Human MUC20(Mucin-20) ELISA Kit氧氟沙星
人腫瘤抑制蛋白抗體Human SHANK1 ELISA Kit青霉素V鉀
Hemk甲基轉(zhuǎn)移酶家族1號(hào)蛋白抗體Human SH3GL2 ELISA Kit毛地黃皂苷
Hemk甲基轉(zhuǎn)移酶家族2號(hào)蛋白抗體Human SH3PXD2A ELISA Kit熒光紅
HEN1甲基轉(zhuǎn)移酶同源蛋白1抗體Human SHARPIN(Sharpin) ELISA Kit羧甲基纖維素CM-22
缺氧誘導(dǎo)基因2蛋白抗體Human SHD ELISA Kit葡聚糖凝膠LH-20
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使??前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。